肠道杆菌培养物和染色标本观察

1、革兰氏染色标本:大肠杆菌和伤寒杆菌革兰氏染色呈红色、G-杆菌,两端钝圆,中等大小。

2、琼脂平板培养物

(1)伊红美蓝培养基:为常用的肠道致病菌分离鉴别培养基。在该培养基上,大肠杆菌能发酵乳糖产酸,使伊红与美蓝合成紫黑色化合物,故其菌落呈紫黑色,伤寒杆菌对乳糖不分解,故其菌落呈无色或微黄色透明菌落。

(2)S-S培养基:为常用的肠道致病菌选择培养基,内含柠檬酸钠、煌绿对大肠杆菌有抑制作用,胆盐对沙门菌、痢疾杆菌有促生长作用,还含有乳糖和酸碱指示剂中性红。在该培养基上,大肠杆菌能分解乳糖产酸,使菌落呈红色,伤寒杆菌不能分解乳糖,菌落无色透明。

(3)双糖铁斜面:是一种高层斜面培养基,由两层组成。上层是用蛋白胨水加入1%乳糖和硫酸亚铁制成的固体斜面,以酚红为指示剂,可观察细菌对乳糖发酵结果和硫化氢试验结果。下层为含葡萄糖的蛋白胨水半固体,以酚红为指示剂,可观察细菌的动力和乳糖发酵能力。接种时,先用接种针按半固体培养基接种法 穿刺接种,沿原线退出后再划线接种斜面。置37℃恒温箱经18~24小时培养后观察细菌生长情况(表1)。

表1 大肠杆菌和伤寒杆菌在双糖铁斜面上的生长情况

菌种

乳糖

硫化氢

葡萄糖

动力

大肠杆菌

产酸产气

产酸产气

伤寒杆菌

+/-

产酸产气

2014-12-12