肥达氏试验

将已知的伤寒杆菌“O”抗原、“H”抗原和甲型、乙型副伤寒杆菌“H”抗原与病人血清混合作试管定量凝集试验,以检测病人血清中的相应抗体,临床上作为诊断伤寒和副伤寒的参考依据。 结果判定与书写

根据凝集反应的强弱,分别用“++++”、“+++”、“++”、“+”和“-”表示。

1. ++++:完全凝集,上层液体清澈透亮,细菌完全凝集沉淀于管底。

2. +++:大部分凝集,上层液体基本透明,细菌大部分(75%)凝集沉淀于管底。

3. ++:中度凝集,上层液体半透明,管底有明显凝集沉淀物。

4. +:弱凝集,上层液体混浊,管底仅有少量凝集沉淀物。

5. -:不凝集,液体呈乳状,管底有明显凝集沉淀物。

判断血清凝集效价:先要看各排对照管,在对照管均不发生凝集时,依次观看各试验管,以出现明显凝集现象(++)的血清最高稀释倍数作为该血清的凝集效价(抗体效价)

1. 将大小一致的小试管放置试管架,4排,每排8支,作好标记。

2. 在所有32支试管中分别加入生理盐水0.5ml。

3. 另取1支试管,加生理盐水1.8ml和病人血清0.2ml,充分混匀,得到1:10稀释血清。在每排第1管中分别加入该1:10稀释血清0.5ml,充分混匀,即得1:20稀释血清。

4. 对倍稀释病人血清:分别从每排第1管中取0.5ml血清加入本排第2管,混匀,再从第2管吸取0.5ml血清加入第3管,混匀。依次类推,直至每排第7管中加入稀释血清0.5ml,混匀后从每排第7管中吸取0.5ml丢弃。从而每排1~7管得到1:20、1:40、1:80、1:160、1:320、1:640、1:1280的对倍稀释血清。第8管不加血清,只加生理盐水作阴性对照。

5. 加入菌液:各排从第8管开始,由后往前每管加入诊断菌液0.5ml。

第1排各管加入伤寒杆菌“H”菌液。

第2排各管加入伤寒杆菌“O”菌液。

第3排各管加入甲型副伤寒杆菌“H”菌液。

第4排各管加入乙型副伤寒杆菌“H”菌液。

此时,各血清管的血清稀释度又增加了1倍,依次为1:40、1:80、1:160、1:320、1:640、1:1280、1:2560,每管总量为1ml。

2014-12-12