由于各种细菌具有不同的酶，故分解糖类的能力不同，分解糖类后的终末产物亦不一致，例如肠道非致病菌一般均有乳糖酶，能分解乳糖产酸(乳酸，甲酸，乙酸等)，尚有甲酸脱氢酶。能将甲酸进一步分解产生气体( CO ₂ ，H ₂ )，而肠道致病菌一般无乳糖酶，不能分解乳糖，因此，细菌的糖发酵试验，可用于鉴别细菌。

用接种环分别取大肠杆菌，伤寒杆菌和乙型副伤寒杆菌少许，接种于葡萄糖及乳糖发酵管中各一支，置37 ℃温箱培养18～24小时，观察结果。观察结果时，首先观察细菌是否生长。细菌生长后，培养基呈混独。若细菌发酵糖类产酸，则培养基中指示剂（溴甲酚紫）变为黄色，以"+"表示。如发酵糖后产酸又产气时，则培养基除变黄色外，在倒置的小管中有气泡，用"（" 表示。如不发酵糖，培养基仍为紫色，小倒管内无气泡，以"一"表示之。