1.  用含10%胎牛血清的完全培养液稀释处于指数生长期的Sf9细胞至约5×10 ⁶ 细胞/ml。在蚀斑试验之前几小时，以两个不同的密度将细胞种于60 mm 组织培养皿中。病毒毒种贮液的每--稀释度均设复孔，于27℃培养。

2.  如下用无血清完全培养液制成5 ml 的病毒贮液的系列稀释液：

（1）纯病毒毒种贮液：10 ^-6 、10 ^-7 、10 ^-8 稀释

（2）转染上清：10 ^-4 、10 ^-5 和10 ^-6 稀释

（3）单个蚀斑：10 ^-1 、10 ^-2 和10 ^-3 稀释

3.  用一根灭菌巴斯德吸管小心从细胞中吸去培养液。每一稀释度的病毒均加1 ml 至各复孔中，于室温或27℃温育1 h，间断摇动以保证病毒和覆盖在细胞上的培养液均匀分布。

4.  温育30 min 后，准备琼脂糖顶层覆盖物。

5.  用一根灭菌巴斯德吸管吸去病毒上清液，加入4 ml 琼脂糖覆盖物，让琼脂糖于室温固化10~20 min 。用Parafilm 膜封住毎个平板（以防干涸），于27℃ 培养4~8天。

6.  在蚀斑形成较好而且裸眼容易看出的培养皿上，计数系列中的每一稀释度形成的烛斑数，计算病毒滴度。

7.  如果裸眼辨别蚀斑时遇到困难，则用台盼蓝染色。准备台盼蓝覆盖物，倾覆1 ml 至培养了3~5天、蚀斑形成较好的培养皿中。于27℃过夜温育培养皿，让染料扩散进入死细胞。计数蓝色蚀斑的数目并确定病毒滴度。