肥达反应实验

用已知的伤寒杆菌H,O抗原和甲,乙型副伤寒杆菌H抗原,与病人血清作定量凝集试验,以测定患者血清中有无相应抗体,根据抗体含量的多少及增长情况,可帮助诊断伤寒及副伤寒。 1.  怎样从急性菌痢患者粪便中分离与鉴定痢疾杆菌?

2.  肥达反应中为什么要用"H","O","PA","PB"四种抗原?

3.  怎样分析本实验室各组肥达反应的结果?

1.  取小试管28支,分四排置于试管架上,每排7支,于每排第一管分别标记H,O,PA,PB 符号。

2.  于各管内加入生理盐水0.5 mL。

3.  于每排第一管各加入1:10病人血清0.5 ml混匀后。从第一排第1管吸出0.5 ml。

注入第一排的第2管作倍比稀释,依次稀释至第6管,并从第6管弃去0.5 ml,第7管为对照。

4.  其他三排按同法稀释。

5.  每排从第7管开始,由后向前每管加入菌液。第一排各管加0.5 mlH菌液,第二排各管加0.5 ml菌液,第三排各管加0.5mlPA菌液,第四排各管和加0.5 mlPB菌液。

6.  振摇试管架,混匀上述液体,置37 ℃18~24 h后取出观察结果。

7.  结果观察

观察时先勿振摇,以免凝块分散。先看对照管,后看试验管。

凝集程度以"+","++","+++","++++"表示,不凝集以"一"表示。"++++":完全凝集,管底有边缘不整齐的膜状凝集块,上层液体澄清透明。

"+++":大部分凝集,凝块非全部下沉于管底而是稍有铺,上层液体澄清。

"++":部分凝集,管底有部分凝集块,上层液体微混浊。

"+":小部分凝集,管底有小量凝集块,上层液体较混浊。

"一":无凝集,液体呈均匀混浊。

记录实验结果及凝集效价。



2014-12-12