《名医别录》对人参的临床药用选择还有“人薓乃重百济者,星系而坚白,味薄於上党,次用高丽,高丽即辽东,形大而虚软,止应择取之尔,实用并不及上党者,不乃百济远矣,百济今属高丽,高丽所献兼有两种”的描述,
由实验结果可知三地人参对正常小鼠的溶血素水平没有影响,实验数据显示正常三地人参灌胃组的溶血素含量虽与空白对照组相比无统计学差异,但3组在含量上均略低于空白对照组,且三地人参效果相似。
这一结果证实,人参可使机体的溶血素含量下降,但对正常机体影响不大,能维持在正常水上平。实验结果还显示三地人参对免疫低下小鼠溶血素含量没有提高作用,其水平不仅低于正常水平,还低于免疫低下模型组的水平。这一结果与人参水溶性物质具有抑制IgG产生的作用这一结论相类似,既人参煎剂使机体的特异性体液免疫水平降低,这一结果与人参产地无关,其机制将在后续研究中探讨。
人参对正常小鼠或免疫功能低下小鼠溶血素含量的影响,三地人参的作用是相同的。
综上实验得出结论:三地人参对正常小鼠溶血素水平没有影响;氢化可的松所致的免疫低下可使小鼠溶血素含量降低,经辽宁、吉林和朝鲜三地人参煎剂灌胃后不能使其溶血素含量提高,且使之进一步下降;人参对免疫低下小鼠溶血素含量的影响与人参产地无关。
实验结果从另一个方面提示,大量资料证实人参对机体免疫系统具有调节作用,特别是对机体细胞免疫功能具有提高作用;本课题组经研究也将在另文中证实人参煎剂可提高机体的T细胞功能。但人参水溶剂对机体的体液免疫的影响还有待进一步研究,因此,人参使用过程中应注意选择适应症,以发挥人参的功效。
一、讨论
近年来对人参的研究更多的是注重对人参的有效成分的研究,如对Rg1、Rg2、Rg3等成分的研究;或是注重人参的某种已知对某种疾病的作用的研究,对于生长环境相似的这三种人参对机体免疫系统影响的比较研究极少。本实验基于这一理由,对三地人参进行了对比研究。
由实验结果可知三地人参对正常小鼠的溶血素水平没有影响,实验数据显示正常三地人参灌胃组的溶血素含量虽与空白对照组相比无统计学差异,但3组在含量上均略低于空白对照组,且三地人参效果相似。
这一结果证实,人参可使机体的溶血素含量下降,但对正常机体影响不大,能维持在正常水上平。实验结果还显示三地人参对免疫低下小鼠溶血素含量没有提高作用,其水平不仅低于正常水平,还低于免疫低下模型组的水平。这一结果与人参水溶性物质具有抑制IgG产生的作用这一结论相类似,既人参煎剂使机体的特异性体液免疫水平降低,这一结果与人参产地无关,其机制将在后续研究中探讨。
人参对正常小鼠或免疫功能低下小鼠溶血素含量的影响,三地人参的作用是相同的。
综上实验得出结论:三地人参对正常小鼠溶血素水平没有影响;氢化可的松所致的免疫低下可使小鼠溶血素含量降低,经辽宁、吉林和朝鲜三地人参煎剂灌胃后不能使其溶血素含量提高,且使之进一步下降;人参对免疫低下小鼠溶血素含量的影响与人参产地无关。
实验结果从另一个方面提示,大量资料证实人参对机体免疫系统具有调节作用,特别是对机体细胞免疫功能具有提高作用;本课题组经研究也将在另文中证实人参煎剂可提高机体的T细胞功能。但人参水溶剂对机体的体液免疫的影响还有待进一步研究,因此,人参使用过程中应注意选择适应症,以发挥人参的功效。
1. 实验分组及处理昆明种小鼠80只,体重18~22 g,随机分为8组,即空白对照组、正常辽宁人参灌胃组、正常吉林人参灌胃组、正常朝鲜人参灌胃组、免疫低下模型对照组、免疫低下辽宁人参治疗组、免疫低下吉林人参治疗组和免疫低下朝鲜人参治疗组,每组10只,雌雄各半。
2. 饲养动物3天后,免疫低下模型组和三地人参免疫低下治疗组小鼠皮下注射氢化可的松注射液,70 mg/kg(体重),1次/d,连续1周。
3. 待模型完成后,空白对照组和免疫低下模型组正常饲养,不限饮食;正常三地人参灌胃组和三地人参免疫低下灌胃组分别以三地人参水煎剂灌胃,5 g/kg(体重)/d(即100%煎剂0.2 mL/只),1次/d,连续2周。
4. 待治疗完成后小鼠眼球取血分离血清。
5. 血清溶血素含量测定用生理盐水将绵羊红细胞(SRBC)水洗3次(1000~2000 r/min,5 min),弃去上清液,3∶5(V/V)用生理盐水把SRBC稀释为2×10 9 个/mL。
6. 取材前4天小鼠腹腔注射配制好的SRBC 0.2 mL
(1)取材当日小鼠摘眼球取血、分离血清,并将血清稀释500倍。
(2)取1 mL 稀释后的血清加入反应管,再加0.5 mL SRBC,置冰浴中,每管加入1 mL 补体。
(3)将反应管移至37℃水浴中,10分钟后再移至冰浴中。
(4)冰浴后2000 r/min 离心10 min,取上清1 mL,加入3 mL 都氏试剂混匀,10 min 后用分光光度计(540 nm)测定吸光度。
7. 测定实验用的SRBC半数溶血时的吸光度值,并取同实验用的SRBC 0.25 mL,加4 mL 都氏试剂,摇匀,10 min后 用分光光度计测定吸光度,作用为半数溶血对照。
8. 换算公式如下:样品HC50=(样品吸光度值×稀释倍数)/SRBC半数溶血时的吸光度。
2. 饲养动物3天后,免疫低下模型组和三地人参免疫低下治疗组小鼠皮下注射氢化可的松注射液,70 mg/kg(体重),1次/d,连续1周。
3. 待模型完成后,空白对照组和免疫低下模型组正常饲养,不限饮食;正常三地人参灌胃组和三地人参免疫低下灌胃组分别以三地人参水煎剂灌胃,5 g/kg(体重)/d(即100%煎剂0.2 mL/只),1次/d,连续2周。
4. 待治疗完成后小鼠眼球取血分离血清。
5. 血清溶血素含量测定用生理盐水将绵羊红细胞(SRBC)水洗3次(1000~2000 r/min,5 min),弃去上清液,3∶5(V/V)用生理盐水把SRBC稀释为2×10 9 个/mL。
6. 取材前4天小鼠腹腔注射配制好的SRBC 0.2 mL
(1)取材当日小鼠摘眼球取血、分离血清,并将血清稀释500倍。
(2)取1 mL 稀释后的血清加入反应管,再加0.5 mL SRBC,置冰浴中,每管加入1 mL 补体。
(3)将反应管移至37℃水浴中,10分钟后再移至冰浴中。
(4)冰浴后2000 r/min 离心10 min,取上清1 mL,加入3 mL 都氏试剂混匀,10 min 后用分光光度计(540 nm)测定吸光度。
7. 测定实验用的SRBC半数溶血时的吸光度值,并取同实验用的SRBC 0.25 mL,加4 mL 都氏试剂,摇匀,10 min后 用分光光度计测定吸光度,作用为半数溶血对照。
8. 换算公式如下:样品HC50=(样品吸光度值×稀释倍数)/SRBC半数溶血时的吸光度。
9. 统计分析各组数据均采用(x±s)表示,采用SPSS17.0统计软件进行方差分析。