1．蟾蜍离体下肢标本的制备
（1）取较大蟾蜍１只，用探针毁其脑脊髓后，腹部向上四肢用图钉固定。
（2）剪开腹部皮肤，沿腹部正中切开腹壁，向腹静脉内注入10g/L(1g/dl)肝素0.5ml。
（3）扩大腹壁切口，向上剪开胸骨，向下直到耻骨联合。将蟾蜍的泄殖腔剪断，将腹内脏器全部推向头端，露出后腹膜（图10-7-1A）。
（4）在左肾外缘剪开后腹膜，即可看到背主动脉（图10-7-1B）
（5）在背主动脉下穿二条细线，拉紧上方(近头端)的线，用眼科剪小心在线的下方剪一小口(稍稍放松拉紧的线，血液从小口中流出时说明口已剪开)。将已排出气体的细塑料管从小口中向下肢方向插入、结扎、固定。(注意剪口应在髂动脉分叉以上0.8~1cm处，以免插管过低，只能灌流一侧下肢(图10-7-1C)。
（6）用粗剪刀将插管以上的躯干横断，注意勿使插管扭转(图10-7-1D)。
（7）用注射器向细塑料管内慢慢推入任氏液2~4ml。将二下肢血管内的血液冲洗干净。
2．连结下肢灌流标本和灌流装置
用蛙心夹夹住下肢标本的脊椎骨断端。蛙心夹的上端结一细线，将整个标本(连同插入血管的细塑料管)悬挂拉力换能器上
3．灌流右旋糖酐溶液
（1）向灌流装置最高处的刻度容器内倒入任氏液，开放螺旋夹使任氏液通过莫非氏滴管，慢慢开放侧管的Ａ弹簧夹来调整空气量，夹紧弹簧夹后，任氏液逐滴进入两后肢，在证明灌流系统通畅稳定后(时间不宜过长)开放Ｂ弹簧夹，使刻度容器内液体会部排出。关紧螺旋夹Ｃ。
（2）向刻度容器倒入定量60g/L(6g/dl)中分子右旋糖酐溶液。
（3）慢慢开放螺旋夹Ｃ使右旋螺酐溶液通过细塑料管进入两下肢，同时开启拉力换能器，断续或连续描记曲线作为基线。
（4）灌流10分钟后，开放Ｂ弹簧夹将右旋糖酐溶液排出，换以任氏液，继续灌流10分钟，灌流速度应与右旋糖酐一致，继续或连续开启拉力换能器描记曲线。
（5）整理和分析实验结果
注意事项
1.蟾蜍要大，否则背主动脉过细，插管不易。
2.细塑料管内避免进入气泡，以防灌流不畅。
3.不要使血管扭曲，扭曲后灌流不畅或停止。
4.灌流液的液面与标本的插管处距离保持在20~30厘米之间。