叶绿素是一种双羧酸的酯类物质,能与碱发生皂化反应而生成叶绿酸的碱性盐,其化学反应如下: 形成盐后,叶绿素的亲水性大大加强,可溶于稀酒精中。
一、材料与设备
叶绿体色素提取液、试管、移液管、20% KOH - 甲醇溶液、苯
二、实验步骤
取3 ml 叶绿体色素提取液,(如提取液太浓,可先加少量酒精稀释)。加入1 ml 20%KOH-甲醇溶液,充分摇匀。放置片刻后,加入3 ml苯,混合后,慢慢加入1 ml 蒸馏水,得到三层溶液,上层是苯溶液,其中溶有胡萝卜素及叶黄素;下层是酒精溶液,其中溶有已皂化的叶绿素a,b及少量叶黄素。试管底部同时出现白色沉淀现象,这是由细胞蛋白质产生的乳化现象。
另取3 ml 叶绿体色素提取液,直接加入3 ml 苯和1 ml 蒸馏水,因叶绿素未经皂化,较易溶于上层的苯溶液层中;与皂化过的不同,在下层酒精溶液中,只溶有一部分叶黄素。