有生命活力的种胚呼吸过程中不断进行氧化还原反应,脱下的氢使辅酶(NAD或NADP)还原。当TTC渗入种胚的活细胞内,作为氢的受体被还原性辅酶(NADH+H+或NADPH+H+)上的氢还原时,便由无色的氯化三苯基四氮唑(TTC)变为红色的三苯基甲臜(TTF)。
一、材料和设备
小麦、玉米、花生或水稻种子
恒温箱、培养皿、刀片、镊子
0.1%TTC溶液:称取0.1克TTC先加少量95%乙醇溶解后加蒸馏水至100 ml 。
二、实验步骤
1.浸种:同BTB法。
2.显色:取吸胀种子10粒,用刀片沿种子胚的中心纵切为两半,每粒种子其中的一半,放在培养皿内,加入适量0.1%TTC溶液,浸没种子,在45℃温箱中20分钟,取出观察, 凡胚被染为红色的是活种子。另一半留作红墨水法。
可取用沸水煮死的种子作同样处理,对照观察。
3.分别数出胚着色的种子,计算有生活力种子的百分率。