植物种子中经常存在着许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质,如某些黄酮类、香豆、素类、酚类物质等,在种子衰老过程中,这些荧光物质的结构和成分往往发生变化,因而荧光的颜色也相应改变;有些种子在衰老死亡时,荧光物质的性质虽未改变,但由于生活力衰退或已死亡的细胞原生质透性增大,浸种时,种子中的荧光物质很容易外渗。前一种情况可以用直接观察种胚荧光的方法确定种子死活,后一种情况则可通过观察荧光物质渗出的多少来确定种子死活。
1.直接观察法:此法适用于一些松株类、禾谷类及某些蔷薇果树种子,但种间差异较大。
用刀片沿胚的中心线将种子纵切成两半,取一半放在不产生荧光的白纸上,使种子的切面朝上,放在紫外线荧光灯下照射并进行观察,记载。有生活力的种子产生明亮的兰色、兰紫色、紫色或兰绿色的荧光,死种子多半是黄色、褐色以至暗淡无光,并带有多种斑点。
观察100粒种子,计算出活种子的百分率。
2.纸上荧光法:此法在十字花科种子中效果较好。
(1)将已吸涨的种子100粒,以3-5 M M 间隔整齐地排列在培养皿中的双层潮湿滤纸上,滤纸上的水分以稍有余滴为度,以免水分过多时,荧光物质流失。
(2)放置1小时后,令其自然风干,于254n M 紫外分析仪照射下观察。死种子周围有明亮的兰色或兰紫色光圈。
(3)计算活种子的百分率。