一、材料和设备
小麦幼苗,直径10 cm 的培养皿,扭力天平,电炉,pH计,50 ml 量筒,100 ml 烧杯,0.5 ml移液管,玻棒,镊子,洗耳球,吸水滤纸,10×10cm 塑料薄膜,琼脂
50pp M 含NH4+的培养液:(1000 ml H2O+183 M g(NH4)2SO4+136 M gCaSO4)
0.6%溴甲酚紫:0.6克溴甲酚紫用少量95%酒精溶解后,用蒸馏水定溶至100 ml
0.01N NaOH,0.01N HCl
二、实验步骤
1.显色基质的准备:取50 ml 含50pp M NH4+的培养液,加入0.5克琼脂和0.5 ml 0.6%的溴甲酚紫指示液,在电炉上搅拌加热至沸腾。然后冷至40℃左右时,用稀NaOH或稀HCl调pH至6.0(暗红色)。
2.显色:将琼脂-指示剂混合液倒入培养皿中,使之成为均一的薄层,冷却凝固后备用。取预先培养7-10天的小麦幼苗(根长10cm左右)1株,用蒸馏水冲洗根系,于塑料薄膜(10×10cm )上展平,并用吸水纸吸干薄膜和根表的水分,反转贴于已凝固的琼脂-指示剂混合液上,轻压驱除气泡并使根系嵌入凝胶中。室温条件下1小时左右,pH指示剂即显颜色变化。
3.观察现象并解释结果:pH指示剂不同颜色指示出不同根际部位的pH值。观察根系周围琼脂-指示剂混合液的颜色变化,确定根系pH是上升还是下降,说明根系pH值变化的原因。本实际可用标准琼脂-指示剂作对照,确定各根区的pH值,还可用微电极进行精确测定。
甲酚红变色范围为pH7.2-8.8(黄-红),适用于碱性条件下使用。
2.塑料薄膜和根表的水分必须吸干,否则影响显色结果。