气孔是陆生植物与外界环境交换水分与气体的主要通道及调节机构。它既要让光合作用需要的CO2通过,又要防止过多的水分损失,因此气孔在叶片上的分布,密度,形状,大小以及开闭情况显著地影响着叶片的光合,蒸腾等生理过程。在研究化学物质及因素对气孔运动的影响时,经常需要观察或测定气孔开闭的程度。气孔运动(stoMatal MovMent)和保卫细胞积累K+有着非常密切的关系,光合磷酸化形成ATP,保卫细胞质膜上具有光活化H+泵,H+泵水解ATP,利用释放能量将H+分泌到细胞壁,内向K+离子通道开启, 外边的K+转移进保卫细胞,从而降低保卫细胞水势,吸水膨胀,使气孔张开。本实验通过人为的增加K+浓度观察气孔的变化。光下植物叶片的气孔开启,暗中气孔关闭。气孔的形态,大小及气孔开度也可在显微镜下直接观察。
1. 取4个培养皿编号,取其中2个分别配制成250 M M 、5O MM KCl溶液2 ml (用Tris-HCl缓冲液稀释);取另外2个培养皿分别加入2 ml Tris-HCl缓冲液待用。
2. 撕2-3 MM 2 的蚕豆叶表皮分别放入上述4个培养皿中,每个培养皿中放3-4片。
3. 将上面所做的1个装有Tris-HCl缓冲液的培养皿放入实验台的抽屉里避光放置1.5 小时,其余3个放在日光灯下照光1.5小时。
4. 分别取出不同处理的叶表皮放在载玻片上,加盖玻片,在显微镜下观察气孔的开度。
注意事项
观察比较不同处理的表皮气孔张开的情况,说明原因。