活种子胚细胞的原生质膜具有半透性,具有选择吸收外界物质的能力,一般染料不能进入活细胞内,胚部不能被染色。而丧失生命力的种子,其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力,染料可以自由进入细胞内而将死胚染色(如酸性靛兰 、红墨水等),故可根据种子胚部是否被染色来判断种子的生命力。
一、材料、设备及试剂
1. 材料:大麦、大豆等作物新种子和贮存三年以上的陈种子。
2. 设备:培养皿,刀片,镊子,烧杯。
3. 试剂:0.1%酸性靛兰水溶液(0.1g溶解在100 ml水中)。
二、实验步骤
1. 种子处理
先将大麦、大豆种子用水浸泡1~2 h ,待充分吸胀后,取出一部分在沸水中煮3~5min,作为死种子。选择浸水的新种子、陈种子和死种子各100粒,如为大豆,用镊子小心剥去种皮,如为小麦则用刀片沿胚部中线纵切成两半,用其中一半进行测定(需要有胚部)。
2. 染色
将处理好的种子均匀摊于培养皿内,加入0.1%酸性靛兰溶液,以浸没种子为度。
3. 冲洗种子
染色15~20分钟后,倾出溶液,用自来水反复冲洗种子,直到所染的颜色不再洗出为止。
三. 观察记载
对比观察冲洗后的新鲜种子,陈种子和死种子的胚部着色情况。凡生活力强的种子,胚完全不着色,或在子叶和胚根上面有不大的着色很淡的斑点,如果整个胚根全部着色或在胚根和子叶上有着色很浓的斑点,就是完全丧失或大部分丧失生活力的种子。统计出具有生活力的种子百分数,作为估计的发芽率,并与实际发芽率(事前用普通发芽实验法测定)作比较。