染色体显带是沿着整个染色体的长轴,能显现出着色深浅不同、横向走行的带(Band)。
显带原理尚未完全弄清,从多种方法证实,染色体显带现象是染色体本身存在着带的结构。因用相差显微镜观察未染色的染色体时,也能直接观察到染色体存在着带的现象。但用特殊方法处理后,再用染料染色,则带更加清楚。
随显带方法不同,显出来的带的特点也不一样,说明带的出现又与染料特异结合有关。一般认为,易着色的阳性带(Positive Band)为含有A-T多的染色体节段;相反,G-C多的则不易着色,为阴性带(Negative Band)。
有报道已被定位的正常基因相异常基因绝大部分都在阴性带区。人们推测,看家基因(House Keeping Gene)可能多在阳性区带,组织特异基因在阴性区带。人染色体能显现出近2000 个G带,这些带再融合成一般显微镜下可见的850 条左右的带。
1. 漂洗
取经过干热预处理或已老化的染色体标本,置入pH6.0缓冲液中浸5~10 分钟;
2. 染色
浸入pH6.0的GM和QD染液中5~10 分钟;
3. 漂洗
浸入新鲜pH6.0缓冲液中漂洗2 次,每次5 分钟;
4. 观察
向标本染色体面滴1~2 滴新鲜缓冲液,覆以盖片(避免出气泡),置荧 光显微镜下观察。
取经过干热预处理或已老化的染色体标本,置入pH6.0缓冲液中浸5~10 分钟;
2. 染色
浸入pH6.0的GM和QD染液中5~10 分钟;
3. 漂洗
浸入新鲜pH6.0缓冲液中漂洗2 次,每次5 分钟;
4. 观察
向标本染色体面滴1~2 滴新鲜缓冲液,覆以盖片(避免出气泡),置荧 光显微镜下观察。
注意事项
1. 观察期间,要随时滴加缓冲液,以防蒸发干涸后荧光减弱。
2. 染色后标本应充分漂洗,避免残留荧光染液,否则背底将发荧光影响观察,标本如因染色不足发光较弱,可揭去盖片重染。
2. 染色后标本应充分漂洗,避免残留荧光染液,否则背底将发荧光影响观察,标本如因染色不足发光较弱,可揭去盖片重染。