高压灭菌的原理是利用增加锅内蒸汽的压力而提高蒸汽的温度,达到杀灭全部微生物的作用。 现在最常用的培养基灭菌条件是1.05kg/cm2(121℃)15min,时间过长有可能破坏培养基的营养成分。含糖的生化培养基的灭苗条件是0.7kg/cm2(116℃)15 min,或用流动蒸汽发灭菌。器皿的灭菌可以1.05kg/cm2(121℃)20min。
高压灭菌操作方法如下:
1. 将欲灭菌物品放入锅内,关闭锅门,拧紧螺丝。确认已经密闭,方可进入下一步操作。
2. 打开排气阀。
3. 打开蒸汽开关,向锅内输送蒸汽或插上电源,使产生蒸汽。
4. 观察排气阀门的排气情况,待排除的气体由冷空气变为蒸汽,温度为(105℃)时,可关闭排气阀。
高压灭菌时须注意,必须待锅内冷气完全排除后才可关闭排气阀加压,否则达不到灭菌效果。
5. 观察压力表升至1.05 kg/cm2开始记时。
6. 压力达到1.05 kg/cm2后,可调节进气阀,减少进气量,维持压力并使其稳定在1.05 kg/cm2。电加热时。可切断电源,维持压力,持续15min,至多不能超过30min,否则营养物受破坏。
7. 关掉进气阀门或切断电源,让锅内物品正常冷却,不可以马上打开排气阀。
8. 待锅内压力降为零时,才打开锅门,取出物品。