高压蒸气灭菌器是一种坚固密闭的带内桶的蒸锅，密封盖上装有压力表、安全阀和排气孔等。锅盖密封旋紧后，对锅底的水进行加热，产生蒸气使锅内压力升高，从而提高锅中水的沸点和蒸气的温度。因高压蒸气的温度较高、释放潜热多、湿热穿透力强，故灭菌效果好。凡耐热耐湿的物品，如手术器械、敷料、生理盐水、普 通培养基、玻璃器皿等均可用此法灭菌。
使用时锅底贮水适量，将灭菌物品放入内桶，盖上锅盖，拧紧螺栓，打开排气孔，开始加热。加热过程中，待锅内冷空气完全排出后，关闭排气孔，继续加热。待压力上升到所需数值（通常为102.97kPa或1.05kg/cm 2 ，此时温度可达121.3℃）时，维持15～20分钟。停止加热后，待压力自行回到零后，打开排气孔，排除余气，开盖取物。
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压 力 |
温度（℃） * |
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千帕（kPa） |
公斤/平方厘米（kg/ cm 2 ） |
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34.32 |
0.35 |
108.8 |
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54.92 |
0.56 |
113.0 |
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68.65 |
0.70 |
115.6 |
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102.97 |
1.05 |
121.3 |
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137.29 |
1.40 |
126.2 |
注意事项
灭菌效果检查：将液体培养基接种有芽孢的枯草杆菌后，置高压灭菌器内1.05kg/cm
2
20分钟灭菌，取出后放37℃48小时，检查有无细菌生长。