1. 在染色片置于光学显微镜下,并用图象捕获软件捕获适当放大倍数下的图象。
2. 在 optimas 中打开图片。
3. 将图片转换成灰度模式。
4. 选定自己所染的目标区域,例如 pvn 区或海马区或 son 区。
5. 确定域值。
6. 指挥计算机根据域值选出符合条件的区域。
7. 将区域的面积、光密度积分值等数据传输到 excel 里。
8. 在 excel 里计算自己所需的目标区域的平均光密度值,并利用它含的统计功能求出统计数值,绘出统计图表
当 optimas 被用于免疫组化结果图象的分析时,有几个关键的软件工具是必须重点提一提的。
1. 目标区域选择工具:用鼠标点击这几个工具后,在图上拖动,可以不同的形状选择自己感兴趣的区域,例如正方形,不定形,或椭圆形。
2. 域值调节工具:在灰度模式图象的色彩值中,0表示黑色,255表示白色。当我们调节域值时,电脑根据我们选定的值的范围,选择符合的图象区域,被选中的区域称为前景,呈现黄色,未被选中的,则是背景。
调节域值,可见参照显示标准为域值线。点开域值调节面板后,可以通过拖动上下两个滚动条、鼠标移动,或者手工输入灰度值,来确定自己所需要计算区域的色彩域值。
3. 自动区域寻找工具:设定域值后,点击此工具,软件会根据域值在目标区内自动生成符合要求的小区域,以红线圈出。此区域也就是我们将从中收集数据的区域。
4. 数据收集设置:可在此面板中设定所需收集的数据类型,数据输出后的目标软件。
5. 宏记录工具:利用此工具,可以将自己需要反复进行的操作记录下来,以后执行每一次相同操作时,运行宏即可以。