DNA核酸浓度的测定实验

构成核酸的嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键,使核苷核和核酸在紫外线光具有特征性的吸收光谱,最大吸收峰为260nm。窄光带紫外分光光度计,长260nm.,比色杯光径1cm,1个吸光度值(1A)相当于50ug/ml双螺DNA,40ug/m1单螺旋DNA或RNA),20ug/ml寡核苷酸

1. 取DNA溶液10ul,加双蒸馏水600ul(即稀释61倍)。

2. 用双蒸馏水调零,测定260nm和280nm的吸光度值(A260. A280).

3. DNA浓度(ug/ul)=A260×50×61/1000

4. DNA纯度:A260/ A280的比值应大于1.7以上,若样品中含有蛋白质(吸收峰在280nm)等杂质时,比值下降,应重新纯化.

2014-12-12