一、实验试剂:
1. 异丙醇(分析试剂)
2. 氧化铝(中性、层分用):用蒸馏水洗数次,倾去不易下沉的细颗粒,吸滤干后在110℃烘箱中活化至少8h,贮存于密闭容器或干燥器中
3. 50g/L 氢氧化钾,内含异丙醇40%
4. 氧化剂:每升中含有无水醋酸铵77g 冰醋酸60ml,过碘酸钠650ml
5. 显色剂:乙酰丙酮0.75ml,异丙醇20ml,用蒸馏水稀释至100ml,贮存棕色瓶内
6,三油酸甘油酯标准液(2.26mmol/l即200g/dl)精确称取纯三油酸甘油酯200mg,用异丙醇配成100ml,紧塞贮4℃冰箱中
二、实验操作:
1. 抽提:方法同胆固醇相同
2. 皂化、氧化,显色、测定管与标准管分别加人相应的抽提液1.0ml,空
白管中加异丙醇lml,各管中加人5Og/LKOH溶液O.2ml皂化,放置60℃水浴15min,冷却后加入氧化剂0.5ml,混匀后加人显色剂O.25ml,再混合,置60℃水浴中20min,取出冷却。
3. 比色:波长410nm 1cm光径比色杯,以空白管调零,读取各管光密度。
三、计算:
血清甘油三酯=测定管吸光度/标准管吸光度×标准浓浓度
2. 皂化. 氧化与显色的温度和时间对显色后的吸光度均有影响.因此每批标本都须做好标准管,而不宜从标准曲线查得结果,显色后的吸光度基本稳定,显色放在室温20℃不避光的条件下,吸光度略会增高,但对测定结果影响不大。
3. 甲醛以乙酸丙酮反应产物的吸收峰在415nm,用721型分光光度计时,420nm比色结果满意。
4. 本法回收试验及重复性好,准确性能符合临床要求。