抗酸染色直接用于痰标本时,可以适当曾加标本涂片的厚度,以提高检出率。染厚涂片时,须掌握复染色时间,如果背景过深,影响镜检。
碱性复红染色法:(萋纳Ziehl-Neelsen法)
一、实验试剂:
1. 萋纳石炭酸复红溶液:
碱性复红乙醇饱和溶液:10ml
5%石炭酸溶液: 90ml
2. 脱色剂:
浓盐酸:3ml 95%乙醇:97ml
3. 复染液(吕弗勒美兰液):
美兰乙醇饱和溶液: 30ml
10%氢氧化钾: 0.1ml
蒸馏水: 100ml
二、染色方法:
l. 涂片经火焰固定,加石碳酸复红溶液,徐徐加热至有蒸汽出现,切不可沸腾。染5min,水洗。
2. 加脱色剂,不时摇动玻片至无红色脱落为止,水洗。
3. 加复染液,染0.5-Imin,水洗。
4. 干后镜检,分枝杆菌呈红色,背景为兰色。
石炭团品红-硫酸美兰染色法
染液:
第一液:石碳酸品红溶液:取碱性品红乙醇饱和液10ml加5%石碳酸水溶液90ml混合。
第二液:硫酸美兰液:美兰2g,溶于75ml水中,慢慢滴加浓硫酸25ml混合即成。
方法:涂片经火焰固定后,滴加第一液微热染3min,水洗。再用第二液染约lmin,水洗。干后镜检。
结果:抗酸菌呈红色,其他皆为兰色。