些菌属能使丙酮酸脱羧，生成中性的乙酰甲基甲醇，通过 KOH和空气的作用，使乙酰甲基甲醇（3-羟基丙酮）转变成双乙酰，双乙酰在α-奈酚和肌酸的催化下，生成红色化合物，为 VP 试验阳性。

将待检菌接种于葡萄糖蛋白胨水培养基，，经 37℃ 培养 48 h 后，按每毫升培养液加 0.1 ml40%KOH（含 0.3%肌酸或肌酐）溶液，48-50℃ 水浴 2 h，或 37℃4 h，充分摇动，观察结果。

实验结果：红色为阳性。

实验应用：鉴别产气肠杆菌和大肠埃希菌，前者阳性，后者为阴性。