一、目的基因的克隆（以pshuttle-CMV质粒为例）
1. 选择适当酶切位点，进行酶切连接，将目的片段插入pshuttl-CMV 质粒多克隆位点。
2. 重组质粒鉴定： 酶切鉴定或测序。
3. 重组质粒扩增，纯化并准备适量含目的基因的穿梭质粒。
4. 用PmeI 单酶切线性化重组穿梭质粒，电泳鉴定质粒完全被切开。
5. 胶回收线性化质粒，以备共转化使用。
2014-12-12