1. 进行预试验以确定最短温育反应时间。冻干两小份50 μl 的融合蛋白溶液,将其中一份重悬于5050 μl 50 mg/ml CNBr/甲酸中,另一份重悬于50 μl 含CNBr 的70%甲酸中,室温下反应。
2. 在0、8、24及48 h 的时刻,各取5 μl 并冻干。
3. 往所有冻干样本加20 μl 1×SDS样品缓冲液,煮沸10 min,加样于SDS-聚丙烯酰胺凝胶。
4. 分析凝胶电泳结果以确定完全裂解蛋白所需的最短温育反应时间。