胶原是细胞生长良好的基质,它是从动物特定组织中用人工法提取出的,利于组织
和细胞的固定,亦属天然培养基。胶原主要用于细胞的附着,能改善细胞表面性质,促
细胞生长。胶原可来自大鼠尾腱、豚鼠真皮、牛真皮、牛眼水晶体等,其中以鼠尾胶原
最为常用和制备简便,可配制成0.1%—1%的醋酸溶液,
1. 取组织
取体重250 g 左右大白鼠一只,从尾根部切断鼠尾,置75%酒精中浸
泡30 分钟;无菌条件下将鼠尾切成1.5 cm 小段,剔除皮毛,抽出尾腱置平皿中;2. 溶解
取1.5 g 剪碎尾腱浸入150ml 醋酸溶液(0.01—0.25 M),置4℃冰箱中, 并不时摇动,48 小时后,移入灭菌离心管中;
3. 分离
以4000 转/分,离心30 分钟,吸取上清液,10 磅10 分钟高压灭菌后分 装入小瓶中,-20℃冰箱保存;
4. 使用方法
用吸管吸少许胶原涂于灭菌培养瓶内壁培养面上,不宜太厚,以 倾斜瓶时不流动为准;
5. 向培养瓶内通以氨气后封上瓶盖;
或用浸有氨水的棉球堵塞瓶口(或不用氨气 处理,而是置37℃温箱过夜;或置室温48 小时,再用无菌蒸馏水冲洗凉干亦 可),作用30 分钟,待胶原凝固,然后用无菌生理盐水冲洗、凉干,即可使用。