一、自制无血清培养基举例
DMEM/F12，1：1 混合成1000 ml； NaHCO 3， 2.4 g； HEPES（1.5 M），10.0 μl； 硒酸（5× －6 M），10.0 μg； 纤粘连蛋白，1 μg/cm 2 （37℃作用15—30 分钟）； 胰岛素，1000.0 μg； 转铁蛋白，5000.0 μg。
2. NIH3T3 小鼠成纤维细胞培养基
DMEM/F12，1：1 混合； HEPES，15 mM； 大豆胰酶抑制剂，0.1%； 胰岛素，10.0 μg/ml； 转铁蛋白，25.0 μg/ml； 纤粘连蛋白，5.0 μg/ml。
3. 人支气管上皮细胞培养基
DMEM/F，1：1 混合； HEPES，15 mM； 硒酸钠，2.5×10 －8 M； 胰岛素，5.0 mg/ml； 胰高血糖素 0.2 μg/ml； 维A酸10 －9 M（或三碘甲状腺原胺酸5×10 －10 M）。
4. 正常人乳腺上皮细胞培养基
MCDB170 基础培养液； 胰岛素，5.0 μg/ml； 氢化可的松，0.5 μg/ml； 表皮生长因子（EGF），5.0 mμg/ml； 乙醇胺，10 －4 M； 磷酸乙酸胺，10 －4 M； 转铁蛋白，10 μg/ml； 牛垂体提取物，70 μg/ml。
5. 杂交瘤细胞系培养基
DMEM/F12，1：1 混合； NaHCO 3， 1.2 g/L； HEPES，15.0 mM； 胰岛素，5.0 μg/ml； 氨基乙醇，20.0 μM； 硒酸，2.5 mM； 转铁蛋白，35.5 μg/ml。
以上仅是个别实验室的应用配方，但仍有很大的参考意义。然而某一种成分是否必 需，并不是绝对的，用量也可以变更。如杂交瘤细胞无血清培养基可去除氨基乙醇；转 铁蛋白降至每毫升5 微克，同样也能获得继续分泌抗体的结果。
1. 小鼠胚胎癌细胞系培养基
DMEM/F12，1：1 混合成1000 ml； NaHCO 3， 2.4 g； HEPES（1.5 M），10.0 μl； 硒酸（5× －6 M），10.0 μg； 纤粘连蛋白，1 μg/cm 2 （37℃作用15—30 分钟）； 胰岛素，1000.0 μg； 转铁蛋白，5000.0 μg。
2. NIH3T3 小鼠成纤维细胞培养基
DMEM/F12，1：1 混合； HEPES，15 mM； 大豆胰酶抑制剂，0.1%； 胰岛素，10.0 μg/ml； 转铁蛋白，25.0 μg/ml； 纤粘连蛋白，5.0 μg/ml。
3. 人支气管上皮细胞培养基
DMEM/F，1：1 混合； HEPES，15 mM； 硒酸钠，2.5×10 －8 M； 胰岛素，5.0 mg/ml； 胰高血糖素 0.2 μg/ml； 维A酸10 －9 M（或三碘甲状腺原胺酸5×10 －10 M）。
4. 正常人乳腺上皮细胞培养基
MCDB170 基础培养液； 胰岛素，5.0 μg/ml； 氢化可的松，0.5 μg/ml； 表皮生长因子（EGF），5.0 mμg/ml； 乙醇胺，10 －4 M； 磷酸乙酸胺，10 －4 M； 转铁蛋白，10 μg/ml； 牛垂体提取物，70 μg/ml。
5. 杂交瘤细胞系培养基
DMEM/F12，1：1 混合； NaHCO 3， 1.2 g/L； HEPES，15.0 mM； 胰岛素，5.0 μg/ml； 氨基乙醇，20.0 μM； 硒酸，2.5 mM； 转铁蛋白，35.5 μg/ml。
以上仅是个别实验室的应用配方，但仍有很大的参考意义。然而某一种成分是否必 需，并不是绝对的，用量也可以变更。如杂交瘤细胞无血清培养基可去除氨基乙醇；转 铁蛋白降至每毫升5 微克，同样也能获得继续分泌抗体的结果。
1. 选择适宜的培养基质（ECM），先制备成贮存干液；
2. 使用前，贮存干液用高纯度的蒸馏水稀释成0.1 mg/ml 浓度的使用液；
3. 使用液用0.22 μm 孔径的微孔滤膜过滤除菌；
4. 用吸管吸取使用液，均匀涂于消毒灭菌的细胞培养器皿的细胞生长表面。使 用液的用量可按每平方厘米表面加50 μl的溶液，为保证其表面全部被溶液浸 湿，用量可适当增减；
5. 室温下静置5 分钟（使用胶原做基质时，可适当延长时间至24 小时），然后 吸出多余的溶液；
6. 再用灭菌蒸馏水（100 μl/cm2）洗涤涂有ECM的表面，然后尽量将水分吸净控干；
7. 根据不同细胞生长特点，接种适宜浓度的细胞进行培养。
2. 使用前，贮存干液用高纯度的蒸馏水稀释成0.1 mg/ml 浓度的使用液；
3. 使用液用0.22 μm 孔径的微孔滤膜过滤除菌；
4. 用吸管吸取使用液，均匀涂于消毒灭菌的细胞培养器皿的细胞生长表面。使 用液的用量可按每平方厘米表面加50 μl的溶液，为保证其表面全部被溶液浸 湿，用量可适当增减；
5. 室温下静置5 分钟（使用胶原做基质时，可适当延长时间至24 小时），然后 吸出多余的溶液；
6. 再用灭菌蒸馏水（100 μl/cm2）洗涤涂有ECM的表面，然后尽量将水分吸净控干；
7. 根据不同细胞生长特点，接种适宜浓度的细胞进行培养。
注意事项
1. 制备过程要在严格无菌条件下进行。