组织的分离实验-离心分离法

如培养物为血液、羊水、腹水和胸水等细胞悬液时,可采用离心法分离。一般用低 速500~1000 转/分速度,离心5~10 分钟即可。如悬液量大,离心时间可适当延长,但 如离心速度过大和时间太长,易压挤细胞使之受损或死亡。微量全血法淋巴细胞培养时, 可不必进行淋巴细胞分离,可采用全血培养法。在需用大量白细胞进行培养情况下,才 应采用特殊分离技术如使用分层液等方法。
国产淋巴细胞分层液(Lyphocyte Separation Medium)效果很好。分层液是根据细 胞比重不同,使各类细胞相互分开的。红细胞比重1.092,淋巴细胞和大单核等白细胞 比重为1.070;分层液适用于分离血中淋巴细胞。

1.  取抗凝血若干毫升;


2.  按1:1 加入无菌分层液(滤过除菌)后,800—1000 转离心;

3.  无菌分离出白细胞(白细胞位于红细胞上层,呈微白色);

4.  BSS 漂洗1—2 次,可用于培养或其它实验。
注意事项
1.  如用动物皿(如小鼠),白细胞的比重与人不同;小鼠白细胞比重为1.080左右,需用相应比重的分层液。

2014-12-12