1. 提取
取2.000 g样品于50 mL聚四氟乙烯离心管中,依次加入100 uL混合内标工作液(10 ng/mL),5~20 mL 0.2 mol/L的HCl溶液(以样品完全浸润为准)和50 uL 100 mmol/L的2-NBA溶液,振荡30 min后,反应混合物于37 ℃恒温箱中放置过夜(16 h)。
2. 净化
取出样品,冷却至室温。加入0.5~2 mL 0.3 mol/L的Na3PO4(5 mL HCl对应0.5 mL Na3PO4),再用 2 mol/L的NaOH调节pH7.4(±0.2)。用5~20 mL(与加入HCl溶液体积一致)乙酸乙酯提取,振荡20 min,4000 r/min离心5 min,收取上层液体;5~20 mL乙酸乙酯再提取一次,合并乙酸乙酯提取液,40 ℃下N2吹干。残留物用1 mL流动相A溶解,再用3 mL正己烷(乙腈饱和)分两次提取,去除脂肪。下层水相过0.20 um微孔滤膜后,取100 L进样检测。
3. 串联质谱测定条件
毛细管电压3.5 KV,源温度120 ℃,去溶剂温度350 ℃,锥孔气流100 L/h,去溶剂气流60 L/h,碰撞气体为氩气,碰撞气压2.60 × 10-4 Pa。ESI+ , MRM方式检测。