HE染色也称苏木精-伊红染色,它是常规染色。苏木精是一种天然染料,它本身并不能染色,在经氧化后变成苏木红才是真正的染料,苏木对细胞核的亲和力并不强,而在媒染剂的帮助下才能较好显示细胞核,此时细胞核呈红色,只有在碱性环境中,苏木才变成蓝色。伊红Y是人工全盛染料,它可能是通过渗透或弥散作用完成染色的,因此和组织万分结合是不牢固的。它对细胞质着色。
肿瘤细胞一般体积大,是正常细胞的3倍以上,核大,核畸形怪状,染色深,和分裂相多见,而且多见病理性核分裂相.肿瘤细胞排列松散,容易脱落。肿瘤细胞核浆比例失调,细胞浆染色改变,或者出现空泡,癌细胞背景则是多有坏死。光学显微镜是利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,以供人们提取微细结构信息的光学仪器。通过光学显微镜检测肿瘤细胞形态有两种方法:HE 染色法和瑞氏和杰姆萨混染法。
一、具体操作
1. 准备组织切片。
2. 37℃温BSS漂洗3次,每次2-3 min。
3. 中性福尔马林固定30 min。
4. 蒸馏水漂洗1次。
5. 用蒸馏水稀释的苏木精液(1/20)染10 min。
6. 自来水洗。
7. 置人1%NaHCO3液中漂洗至蓝紫色。
8. 伊红染液染30 s-1 min。
9. 蒸馏水洗。
10. 迅速通过丙酮2次,每次3-5 min。
11. 通过2:1丙酮-二甲苯3次,每次1-2 min。
12. 纯二甲苯5-10 min。
13. 树胶封片,即可镜检。
二、结果评价
细胞核染蓝紫色,细胞质桃红色。组织细胞排列紧密,凋亡细胞与正常细胞分离,胞核皱缩,但因与组织分离,凋亡细胞略显大。