溴化乙锭是一种荧光染料，在凝胶电泳中，EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间，在紫外线激发下发出荧光,其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260nm，在此波长下，吸光度1 A相当于一定浓度的核酸，可以通过A
260
/A
280
的比值，来测定所得核酸的纯度。
1. 将分光光度计打开，预热10分钟。
2. 将核酸溶液中取2 µl，加（或纯水）使体积成为100 µl。
3. 将稀释溶液加入石英管，以TE buffer（或纯水）为标准倒入另一管。
4. 在波长260、280 nm 处测定吸光值。
5. 比较在260 nm 及280 nm 之读值。
注意事项
1. A
260
/A
280
>1.8表示DNA/RNA的纯度高。若数值<<1.8，表示纯度低，这时由OD
260
测得的DNA含量较不可信，核酸溶液中含有较多蛋白质，因此最好将前述所得核酸再重新抽取。
2. 测定260 nm吸光值，OD=1.0代表值如下：
（1）ds DNA （double stranded DNA） = 50 mg/ml
（2）ss DNA （single stranded DNA or simgle-stranded RNA） = 40 mg/ml
（3）oligonucleotide = 33 mg/ml
3. EB是致癌物质，切勿用手接触，更不要污染环境。