浸润性生长是细胞浸入或穿透其它组织增殖生长能力,浸润生长性检测是检测癌性细胞的一项有意义的指标。检测方法需用其它正常组织和癌细胞共同培养,观察癌细胞向正常组织浸润生长的情况。
常用鸡胚皮肤或心肌组织块,作为被浸润生长的对象;今
以鸡胚皮肤为例,培养过程如下
(1)鸡胚浸出液制备
(3)鸡胚皮培养
无菌从10 天胚龄鸡胚背部取皮,切成6~8 mm 3 小块;每皿中置2~ 3 块,贴在琼脂层表面;
(4)取内径6 mm,厚2 mm的无菌小磁杯或玻璃圈(硅橡胶圈亦可),套在鸡皮小块上;
(5)共培养
向每个小磁圈中加入25~30 μl细胞悬液(含10 4 个细胞的2 倍培养液), 盖上平皿盖,置37 ℃CO 2 温箱中培养;
(6)补液
次日再向每个环中补加2 倍培养液2.5 μl;
(7)切片观察
第4 天挖取出鸡皮块,10 %福尔马林固定,常规包埋、切片、染色、 光学显微镜下观察细胞对鸡胚皮肤浸润的情况。
2. 结果
如癌性细胞已浸入鸡胚皮肤内,说明该细胞具有浸润生长能力。
1. 程序
(1)鸡胚浸出液制备
(2)琼脂层制备
1 %Bacto琼脂(用不含NaHCO
3
的Eagle缓冲液配)10 分
小牛血清 4 分
鸡胚浸出液 4 分
(3)鸡胚皮培养
无菌从10 天胚龄鸡胚背部取皮,切成6~8 mm 3 小块;每皿中置2~ 3 块,贴在琼脂层表面;
(4)取内径6 mm,厚2 mm的无菌小磁杯或玻璃圈(硅橡胶圈亦可),套在鸡皮小块上;
(5)共培养
向每个小磁圈中加入25~30 μl细胞悬液(含10 4 个细胞的2 倍培养液), 盖上平皿盖,置37 ℃CO 2 温箱中培养;
(6)补液
次日再向每个环中补加2 倍培养液2.5 μl;
(7)切片观察
第4 天挖取出鸡皮块,10 %福尔马林固定,常规包埋、切片、染色、 光学显微镜下观察细胞对鸡胚皮肤浸润的情况。
2. 结果
如癌性细胞已浸入鸡胚皮肤内,说明该细胞具有浸润生长能力。