1. 在3个无菌培养试管中各加人5 ml LB培养液，并标上序号1、2、3。
2. 吸取5 μl 细菌培养液加入1号试管中振荡揺匀。
3. 接着从1号试管吸5 μl 稀释液加入 2号试管振荡摇匀。
4. 从2号试管吸5 μl 稀释液加入3号试管振荡摇匀，每次都使用新的吸头。
5. 从每个试管中分别取100 μl 菌液涂布于LB平皿上，并且做好记号，待平板干后于 37℃培养过夜。
6. 计算每亳升细菌细胞数：细菌细咆数/ml=10×菌落数×稀释倍数。
7. 包裹好平板保存于4℃以备进一步实验用。
7. 包裹好平板保存于4℃以备进一步实验用。