细胞的PFA固定实验

1.  吸取浓度为2×10 7 细胞/ml 的细胞悬液10 μl,滴于多聚L-赖氨酸包被的载玻片上。置于加湿盒中,使细胞静置30 min。

2.  将玻片放入玻片架,浸于盛有4%PFA固定液的染色用玻璃盘中,室温固定 20 min。

3.  将玻片架移至另一盛有3×PBS的盘中,放置2 min(此步终止PFA固定作用)。

4.  将玻片架移至一新的含1×PBS的盘中,放置2 min。换1×PBS后,再放置2 min。

5.  在盘中相继加换50%、70%、95%、100%乙醇,在毎种溶液中放置5 min 以进行脱水。
6.  在空气中使玻片完全干燥,放于有干燥剂的玻片盒中,-70℃存放(可存数周)。

2014-12-12