1. 吸去并弃掉培养基。
2. 用 D-PBSA 冲洗单层细胞，弃掉冲洗液。
3. 每 25 cm 2 加入 D-PBSA / 甲醇 5 ml，静置 2 min，弃掉 D-PBSA / 甲醇。
4. 加入新甲醇 5 ml，静置 10 min。
5. 弃掉甲醇，将培养皿倒干净，使其干燥。
6. 每 25 cm 2 加入 5 ml 结晶紫，静置 10 min。
7. 过滤漏斗（大小要适合于每个培养皿中盛载 5 ml 的染液）放置在瓶上。
8. 将染液倒入漏斗。
9. 用自来水冲洗培养皿，然后用去离子水冲洗，干燥培养皿。