体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以1:2 或l:3 以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养。 细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增3～6 次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数／100 个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2％～0.5％，肿瘤细胞可达3～5％。 细胞接种2～3 天分裂增殖旺盛，是活力最好时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。
1. 将长成单层的原代培养细胞或HeLa 细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置5～10 分钟。
2. 在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入3～5 ml 新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。
3. 将细胞悬液吸出2 ml 左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3 ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。
4. 结果
一般情况，传代后的细胞在2 小时左右就能附着在培养瓶壁上，2～4 天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。