人体微量全血培养是一种简单的淋巴细胞培养方法。此法采血量少、操作简便,在PHA作用下进行短期培养即可获丰富的、有丝分裂活跃的淋巴母细胞,适于制备核型标本。各种因素的效应(如病毒、电离辐射、化学药剂等)也可在淋巴细胞的培养条件下进行观察,从而进行多种在体内无法进行的研究。
1. 打开超净台紫外灯20~30分钟。
2. 洗手、换洁净白大衣后进入操作室。启动超净台,点燃煤气灯。
3. 用75%酒精棉球擦洗手、各种试剂瓶及操作台面,然后将培养液及肝素、秋水仙素、PHA等所需溶液移入超净台。
4. 在超净台内将每个培养瓶装入5 ml 培养液及0.2 ml PHA溶液,封好备用。
5. 用5 ml 注射器,7号针头,先吸取少许肝素湿润针筒,然后从肘静脉抽血1~2 ml。
6. 每个培养瓶接种全血0.2 ml 左右轻轻摇动使血和培养液混匀。
7. 在培养瓶上标记好供血者姓名、性别、采血日期等,放入培养箱中37℃培养。
8. 每天轻轻震荡培养瓶二、三次,防止血球沉积并保证血细胞与培养液充分接触,促进细胞生长繁殖。