Southern 印迹实验-碱性缓冲液法

用带正电荷的尼龙膜时,如果用碱性转移缓冲液,则转移的DNA可共价结合于膜上。

1.  印迹法中步骤1和歩骤2中所述准备凝胶及用0.25 mol/l HCl处理。

2.  用蒸馏水漂洗凝胶,并用10倍体积的0.4 mol/l NaOH变性,缓慢摇动20 min。

3.  用0.4 mol/l NaOH替代20×SSC作为转移液进行转印。转印时间≥2 h。
4.  取出膜,用2×SSC漂洗,置于一张Whatman 3 MM 滤纸上晾干,保存于室温。

2014-12-12