人α2a,α2b干扰素检测实验

选用2种针对rHuIFN-α2a和rHuIFN-α2b分子不同表位的McAb,1种McAb作为包被抗体,另1种McAb标记辣根过氧化物酶(HRP)作为结合物,催化底物显色。根据标准品OD值绘制标准曲线,在标准曲线上查出待检标本的含量。
1.  向ELISA板中加入稀释好的包被抗体100 μl/孔, 4 ℃  24~48 h

2.  洗3次,加入10倍连续稀释的待测标本( 做4个稀释度即可)或倍比稀释的标准品(6个稀释度)100 μl/孔, 37 ℃,1 h


3.  洗3次,加入稀释好的酶标抗体100 μl/孔,
37 ℃,45 min

4.  洗4次,加入配好的ABTS底物液100 μl/孔,
RT,30 min

5.  测410 nm OD
6.  绘标准曲线
注意事项
1.  待检标本必须无污染,无溶血。

2.  标本稀释后加入ELISA板时,注意从低浓度向高浓度依次加入。

3.  结合物稀释液和底物缓冲液中禁止加入叠氮钠。

2014-12-12