配制L Terrific Broth (TB) Medium
表 1. 配方
试剂名称 | 试剂量 | 浓度 | 分子式/分子量 | CAS号 |
---|---|---|---|---|
蛋白胨 | 12 g | 12 g/L | /0 | 75-75-2 |
酵母提取物 | 24 g | 24 g/L | /0 | 8013-01-2 |
甘油 | 4 mL | 0.4% v/v | C3H8O3/92.09 | 56-81-5 |
磷酸二氢钾 | 2.313 g | 0.017 M | KH2PO4/136.09 | 7778-77-0 |
12.54 g | 0.072 M | K2HPO4/174.18 | 7758-11-4 |
- 在合适的容器中装入 0.8 L 的蒸馏水.
- 往溶液中加入 12 g 的 蛋白胨.
- 往溶液中加入 24 g 的 酵母提取物.
- 往溶液中加入 4 mL 的 甘油.
- 往溶液中加入 2.313 g 的 磷酸二氢钾.
- 往溶液中加入 12.54 g 的 磷酸氢二钾.
- 加入 蒸馏水 直到体积为 1 L.
- 最初的建议是将磷酸盐缓冲液和琼脂分别进行高压灭菌,因为磷酸盐和琼脂结合后会发生反应,产生 H2O2。幸运的是,由于大肠杆菌的过氧化氢酶表达量很高,这种反应对它们的影响不大。尽管如此,商业混合物并没有将这两种成分分开,仍然建议进行高压灭菌。值得注意的是,将甘油单独高压灭菌也是必要的,因为甘油会与胰蛋白酶/酵母提取物中的胺发生马氏反应。虽然甘油中的羰基较少,不会引起马氏反应,但它仍会螯合营养物质并形成抑制生长的化合物。