Terrific Broth (TB) Medium配方和制备方法

配制L  Terrific Broth (TB) Medium

表 1. 配方

试剂名称试剂量浓度分子式/分子量CAS号
蛋白胨12 g12 g/L/075-75-2
酵母提取物24 g24 g/L/08013-01-2
甘油4 mL0.4% v/vC3H8O3/92.0956-81-5
磷酸二氢钾2.313 g0.017 MKH2PO4/136.097778-77-0
12.54 g0.072 MK2HPO4/174.187758-11-4
  1. 在合适的容器中装入 0.8 L 的蒸馏水.
  2. 往溶液中加入 12 g蛋白胨.
  3. 往溶液中加入 24 g酵母提取物.
  4. 往溶液中加入 4 mL甘油.
  5. 往溶液中加入 2.313 g磷酸二氢钾.
  6. 往溶液中加入 12.54 g磷酸氢二钾.
  7. 加入 蒸馏水 直到体积为 1 L.
  8. 最初的建议是将磷酸盐缓冲液和琼脂分别进行高压灭菌,因为磷酸盐和琼脂结合后会发生反应,产生 H2O2。幸运的是,由于大肠杆菌的过氧化氢酶表达量很高,这种反应对它们的影响不大。尽管如此,商业混合物并没有将这两种成分分开,仍然建议进行高压灭菌。值得注意的是,将甘油单独高压灭菌也是必要的,因为甘油会与胰蛋白酶/酵母提取物中的胺发生马氏反应。虽然甘油中的羰基较少,不会引起马氏反应,但它仍会螯合营养物质并形成抑制生长的化合物。