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pRL-null 载体 (V011446)

我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。

所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。

确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)

开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。

由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。

载体名称:
pRL-null
载体抗性:
Ampicillin
载体长度:
3320 bp
载体类型:
Luciferase Vectors
复制子:
ori
载体来源:
Promega
拷贝数:
High copy number

pRL-null 载体图谱

pRL-null3320 bp6001200180024003000MCSchimeric intronT7 promoterRlucSV40 poly(A) signalAmpR promoterAmpRori

质粒操作方法

1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)

2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）

3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；

4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);

5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;

6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);

7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

pRL-null 载体序列

LOCUS       pRL-null.        3320 bp DNA     circular SYN 01-JAN-1980
DEFINITION  Promoterless mammalian vector encoding wild-type Renilla luciferase.
ACCESSION   .
VERSION     .
KEYWORDS    pRL-null
SOURCE      synthetic DNA construct
  ORGANISM  synthetic DNA construct
REFERENCE   1  (bases 1 to 3320)
  AUTHORS   Promega
  TITLE     Direct Submission
REFERENCE   2  (bases 1 to 3320)
  AUTHORS   .
  TITLE     Direct Submission
COMMENT     SGRef: number: 1; type: "Journal Article"
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..3320
                     /mol_type="other DNA"
                     /organism="synthetic DNA construct"
     misc_feature    1..78
                     /label=MCS
                     /note="MCS"
                     /note="multiple cloning site"
     intron          104..236
                     /label=chimeric intron
                     /note="chimera between introns from human beta-globin and 
                     immunoglobulin heavy chain genes"
     promoter        281..299
                     /label=T7 promoter
                     /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
     CDS             309..1241
                     /label=Rluc
                     /note="luciferase from the anthozoan coelenterate Renilla 
                     reniformis (sea pansy)"
     polyA_signal    complement(1275..1396)
                     /label=SV40 poly(A) signal
                     /note="SV40 polyadenylation signal"
     promoter        1529..1633
                     /label=AmpR promoter
     CDS             1634..2491
                     /label=AmpR
                     /note="beta-lactamase"
     rep_origin      2665..3253
                     /direction=RIGHT
                     /label=ori
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                     replication"