我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来,主要是为了方便研究工作,其中一小部分质粒进行了质量控制,可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用,不能应用于临床试验,包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确,但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列,可能与测序结果不一致,请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序,本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%,则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知,具有很大的不确定性,在任何情况下,我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pBIND-ERα
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 7605 bp
- 载体类型:
- Luciferase Vectors
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Promega
- 筛选标记:
- Neomycin/G418(Geneticin)
- 拷贝数:
- High copy number
- 启动子:
- SV40
pBIND-ERα 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式:质粒干粉(常温运输,存于-20度,请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O溶解质粒;(质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大,这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致,因此建议先转化提质粒后再使用)
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h,如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化;没有菌落则加入10μl质粒转化;建议不要直接转表达感受态, 要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pBIND-ERα 载体序列
LOCUS pBIND-ER(alpha). 7605 bp DNA circular SYN 01-JAN-1980
DEFINITION Renilla luciferase vector encoding the Gal4 DNA-binding domain fused
to an estrogen receptor ligand-binding domain.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS pBIND-ER(alpha)
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 7605)
AUTHORS Promega
TITLE Direct Submission
REFERENCE 2 (bases 1 to 7605)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..7605
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
enhancer 139..517
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 518..721
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
intron 857..989
/label=chimeric intron
/note="chimera between introns from human beta-globin and
immunoglobulin heavy chain genes"
promoter 1033..1051
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
CDS 1083..1523
/label=GAL4 DNA binding domain
/note="DNA binding domain of the GAL4 transcriptional
activator"
CDS 1527..1553
/codon_start=1
/product="peptide derived from a human Ig alpha chain"
/label=peptide derived from a human Ig alpha chain
/note="IgA linker"
/translation="PSTPPTPSP"
CDS 1563..2453
/label=ER-LBD
/note="estrogen nuclear receptor alpha ligand-binding
domain"
misc_feature 2465..2520
/label=MCS
/note="pUC18/19 multiple cloning site"
polyA_signal complement(2625..2746)
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
promoter 2991..3348
/label=SV40 promoter
/note="SV40 enhancer and early promoter"
CDS 3399..4331
/label=hRluc
/note="Renilla luciferase"
CDS 4383..5171
/label=NeoR/KanR
/note="aminoglycoside phosphotransferase"
polyA_signal 5238..5286
/label=poly(A) signal
/note="synthetic polyadenylation signal"
promoter 5442..5546
/label=AmpR promoter
CDS 5547..6404
/label=AmpR
/note="beta-lactamase"
rep_origin complement(6565..7153)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
misc_feature 7269..7552
/label=cer region
/note="ColE1-derived recombination site that helps to
maintain plasmids as monomers"