我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pKZ14
- 载体抗性:
- Chloramphenicol
- 载体长度:
- 4037 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- R6K γ ori
- 载体来源:
- Zhou L, Zhang K, Wanner BL.
pKZ14 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pKZ14 载体序列
LOCUS 40924_27139 4037 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018
DEFINITION Cloning vector pKZ14, complete sequence.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4037)
AUTHORS Zhou L, Zhang K, Wanner BL.
TITLE Chromosomal expression of foreign and native genes from regulatable
promoters in Escherichia coli
JOURNAL Methods Mol. Biol. 267, 123-134 (2004)
PUBMED 15269420
REFERENCE 2 (bases 1 to 4037)
AUTHORS Zhou L, Zhang K, Wanner BL.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (13-FEB-2003) Biological Sciences, Purdue University,
Lilly Hall, West Lafayette, IN 47907, USA
REFERENCE 3 (bases 1 to 4037)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 4037)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Methods
Mol. Biol. 267, 123-134 (2004)"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(13-FEB-2003) Biological Sciences, Purdue University, Lilly Hall,
West Lafayette, IN 47907, USA"
COMMENT SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4037
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
terminator 50..136
/label=rrnB T1 terminator
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 228..255
/label=rrnB T2 terminator
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
regulatory 289..607
/note="araB; LT2"
/regulatory_class="promoter"
promoter 635..726
/label=AmpR promoter
CDS 727..1584
/label=AmpR
/note="beta-lactamase"
terminator 1678..1924
/label=lambda tL3 terminator
/note="transcription terminator tL3 from phage lambda"
protein_bind 1938..2255
/label=phage Phi-80 attP
/note="attachment site of phage phi-80"
rep_origin complement(2366..2754)
/direction=LEFT
/label=R6K gamma ori
/note="gamma replication origin from E. coli plasmid R6K;
requires the R6K initiator protein pi for replication"
CDS complement(2905..3561)
/label=CmR
/note="chloramphenicol acetyltransferase"
promoter complement(3562..3664)
/label=cat promoter
/note="promoter of the E. coli cat gene encoding
chloramphenicol acetyltransferase"
misc_feature 3861..4037
/label=oriT2
/note="oriT2"