我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来,主要是为了方便研究工作,其中一小部分质粒进行了质量控制,可供科学家使用。

所有的产品都严格仅供科学研究使用,不能应用于临床试验,包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。

确保质粒的关键元件正确,但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列,可能与测序结果不一致,请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序,本页面一般会提供下载)

开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%,则将其视为正确。

由于科学研究是在探索未知,具有很大的不确定性,在任何情况下,我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。

载体名称:
p15A-RBS1-A118
载体抗性:
Chloramphenicol
载体长度:
3947 bp
载体类型:
Cloning vector
复制子:
p15A ori
载体来源:
Guo L.

p15A-RBS1-A118 载体图谱

p15A-RBS1-A1183947 bp60012001800240030003600TetRtetR/tetA promotersa118rrnB T1 terminatorT7Te terminatorp15A orilambda t0 terminatorCmRcat promoter

质粒操作方法

1. 发货形式:质粒干粉(常温运输,存于-20度,请务必先转化提质粒后使用)

2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O溶解质粒;(质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大,这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致,因此建议先转化提质粒后再使用)

3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;

4. 加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);

5. 6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;

6. 将平板倒置37℃培养14h,如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化;没有菌落则加入10μl质粒转化;建议不要直接转表达感受态, 要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态);

7. 挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

p15A-RBS1-A118 载体序列

LOCUS       62056_1875        3947 bp DNA     circular SYN 16-MAY-2020
DEFINITION  Cloning vector p15A-RBS1-A118, complete sequence.
ACCESSION   MN623121
VERSION     .
KEYWORDS    .
SOURCE      synthetic DNA construct
  ORGANISM  synthetic DNA construct
REFERENCE   1  (bases 1 to 3947)
  AUTHORS   Guo L.
  TITLE     Direct Submission
  JOURNAL   Submitted (28-OCT-2019) Jiangnan University, State Key Laboratory of
            Food Science and Technology, 1800 Lihu Avenue, Wuxi, Jiangsu 214122,
            China
REFERENCE   2  (bases 1 to 3947)
  AUTHORS   .
  TITLE     Direct Submission
COMMENT     SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted 
            (28-OCT-2019) Jiangnan University, State Key Laboratory of Food 
            Science and Technology, 1800 Lihu Avenue, Wuxi, Jiangsu 214122, 
            China"
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..3947
                     /mol_type="other DNA"
                     /organism="synthetic DNA construct"
     CDS             complement(10..633)
                     /label=TetR
                     /note="tetracycline repressor TetR"
     promoter        649..704
                     /label=tetR/tetA promoters
                     /note="overlapping promoters for bacterial tetR and tetA"
     gene            730..2088
                     /gene="a118"
                     /label=a118
     CDS             730..2088
                     /codon_start=1
                     /transl_table=11
                     /gene="a118"
                     /product="A118 serine recombinase"
                     /label=a118
                     /note="A118"
                     /protein_id="QJR97832.1"
                     /translation="MKAAIYIRVSTQEQVENYSIQAQTEKLTGLCRSKDWDVYDIFIDG
                     GYSGSNMNRPALNEMLSKLHEIDAVVVYRLDRLSRSQRDTITLIEEYFLKNNVEFVSLS
                     ETLDTSSPFGRAMIGILSVFAQLERETIRDRMVMGKIKRIEAGLPLTTAKGRTFGYDVI
                     DTKLYINEEEAKQLQLIYDIFEEEQSITFLQKRLKKLGFKVRTYNRYNNWLTNDLYCGY
                     VSYKDKVHVKGIHEPIISEEQFYRVQEIFTRMGKNPNMNRDSASLLNNLVVCSKCGLGF
                     VHRRKDTMSRGKKYHYRYYSCKTYKHTHELEKCGNKIWRADKLEELIINRVNNYSFASR
                     NVDKEDELDSLNEKLKIEHAKKKRLFDLYINGSYEVSELDSMMNDIDAQINYYESQIEA
                     NEELKKNKKIQENLADLATVDFDSLEFREKQLYLKSLINKIYIDGEQVTIEWL"
     terminator      2112..2183
                     /label=rrnB T1 terminator
                     /note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
                     gene"
     terminator      2199..2226
                     /label=T7Te terminator
                     /note="phage T7 early transcription terminator"
     rep_origin      complement(2388..2933)
                     /direction=LEFT
                     /label=p15A ori
                     /note="Plasmids containing the medium-copy-number p15A
                     origin of replication can be propagated in E. coli cells 
                     that contain a second plasmid with the ColE1 origin."
     terminator      complement(3047..3141)
                     /label=lambda t0 terminator
                     /note="transcription terminator from phage lambda"
     CDS             complement(3165..3821)
                     /label=CmR
                     /note="chloramphenicol acetyltransferase"
     promoter        complement(3822..3924)
                     /label=cat promoter
                     /note="promoter of the E. coli cat gene encoding
                     chloramphenicol acetyltransferase"