我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- 35SRUBY-mini35S-omega
- 载体抗性:
- Spectinomycin
- 载体长度:
- 13798 bp
- 载体类型:
- Protein expression
- 复制子:
- ori
- 宿主:
- Plants
- 筛选标记:
- Hyg
- 拷贝数:
- Low
- 启动子:
- mini35S
- 感受态:
- DH5a
- 培养温度:
- 37℃
35SRUBY-mini35S-omega 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
35SRUBY-mini35S-omega 载体序列
LOCUS . 13798 bp DNA circular UNK 01-JAN-1980
DEFINITION synthetic circular DNA.
ACCESSION
VERSION
KEYWORDS .
SOURCE .
ORGANISM .
.
FEATURES Location/Qualifiers
promoter 39..85
/label="minimal CaMV 35S promoter"
/note="minimal 35S promoter from cauliflower mosaic virus"
misc_feature 120..173
/label="TMV Ω"
/note="translational enhancer from the tobacco mosaic virus
5'-leader sequence (Gallie et al., 1988)"
CDS 180..1670
/gene="CYP76AD1"
/label="CYP76AD1"
/note="Cytochrome P450 76AD1 from Beta vulgaris.
Accession#: I3PFJ5"
CDS 1680..1736
/label="P2A"
/note="2A peptide from porcine teschovirus-1 polyprotein"
terminator 4138..4386
/label="HSP terminator"
/note="efficient transcription terminator from the
Arabidopsis thaliana heat shock protein 18.2 gene (Nagaya
et al., 2010)"
promoter 4866..5049
/label="NOS promoter"
/note="nopaline synthase promoter"
CDS 5101..6111
/label="HygR"
/note="hygromycin B phosphotransferase"
terminator 6164..6416
/label="NOS terminator"
/note="nopaline synthase terminator and poly(A) signal"
misc_feature complement(7229..7253)
/label="LB T-DNA repeat"
/note="left border repeat from nopaline C58 T-DNA"
CDS 7774..8562
/label="SmR"
/note="aminoglycoside adenylyltransferase (Murphy, 1985)"
rep_origin 8811..9399
/label="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
misc_feature complement(9585..9725)
/label="bom"
/note="basis of mobility region from pBR322"
rep_origin complement(10069..10263)
/label="pVS1 oriV"
/note="origin of replication for the Pseudomonas plasmid
pVS1 (Heeb et al., 2000)"
CDS complement(10332..11402)
/label="pVS1 RepA"
/note="replication protein from the Pseudomonas plasmid
pVS1 (Heeb et al., 2000)"
CDS complement(11834..12460)
/label="pVS1 StaA"
/note="stability protein from the Pseudomonas plasmid pVS1
(Heeb et al., 2000)"