质粒编号
质粒名称
规格
价格
V018138
Human L-Lambda WT
5 μg (冻干粉)
我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
High-level human immunoglobulin expression in mammalian cells, especially HEK293 derivatives (like 293-6E), by leveraging the Epstein-Barr virus (EBV) origin of replication (OriP) and a strong CMV promoter.
- 载体名称:
- Human L-Lambda WT
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 4773 bp
- 载体类型:
- Mammalian Expression Vectors
- 拷贝数:
- High copy number
- 启动子:
- CMV
- 感受态:
- DH5a
- 培养温度:
- 37℃
- 表达方法:
- Transient
Human L-Lambda WT 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
Human L-Lambda WT 载体序列
LOCUS Exported 4773 bp DNA circular SYN 08-DEC-2025
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4773)
AUTHORS 11111111
TITLE Direct Submission
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4773
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
enhancer 42..421
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 422..625
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
promoter 688..1172
/label=Adenovirus TPL and MLP
/label=Adenovirus Tripartite Leader and Major Late
Promoter
/note="Regulatory DNA sequence from adenovirus containing
both the tripartite leader and major late promoter
elements, functioning to initiate and enhance transcription
of late viral genes.; id: 3685243"
sig_peptide 1236..1289
/product="human interleukin 10 signal peptide"
CDS 1302..1622
/codon_start=1
/product="constant region of human immunoglobulin labmda
chain"
/label=human Lambda
/translation="GQPKANPTVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKAD
GSPVKAGVETTKPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTE
CS"
polyA_site 1649..1704
/label=beta-globin poly(A) signal
/note="rabbit beta-globin polyadenylation signal"
misc_feature 2017..2744
/label=OriP
/note="Epstein-Barr virus (EBV) origin of replication"
promoter 2873..2977
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
CDS 2978..3838
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 4009..4597
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"