我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pENTR223-MPG
- 载体抗性:
- Streptomycin
- 载体长度:
- 3669 bp
- 载体类型:
- Human ORFeome Gateway entry vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Rual JF, Hirozane-Kishikawa T, Hao T, Bertin N, Li S, Dricot A, Li N, Rosenberg J, Lamesch P, Vidalain PO, Clingingsmith TR, Hartley JL, Esposito D, Cheo D, Moore T, Simmons B, Sequerra R, Bosak S, Do
- 启动子:
- T7
pENTR223-MPG 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pENTR223-MPG 载体序列
LOCUS V006536 3669 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018
DEFINITION Exported.
ACCESSION V006536
VERSION V006536
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
.
REFERENCE 1 (bases 1 to 3669)
AUTHORS Rual JF, Hirozane-Kishikawa T, Hao T, Bertin N, Li S, Dricot A, Li
N, Rosenberg J, Lamesch P, Vidalain PO, Clingingsmith TR, Hartley
JL, Esposito D, Cheo D, Moore T, Simmons B, Sequerra R, Bosak S,
Doucette-Stamm L, Le Peuch C, Vandenhaute J, Cusick ME, Albala JS,
Hill DE, Vidal M.
TITLE Human ORFeome version 1.1: a platform for reverse proteomics
JOURNAL Genome Res. 14 (10B), 2128-2135 (2004)
PUBMED 15489335
REFERENCE 2 (bases 1 to 3669)
AUTHORS De Schamphelaire W, Olbrechts A, Meert J, Verhelst K, Roggeman
Fonseca M, Vanhoucke M, Beyaert R.
TITLE BCCM/LMBP Plasmid collection
JOURNAL Unpublished
REFERENCE 3 (bases 1 to 3669)
AUTHORS De Schamphelaire W.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (06-FEB-2017) BCCM/LMBP, Universiteit Gent,
Technologiepark 927, 9052, BELGIUM
REFERENCE 4 (bases 1 to 3669)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 5 (bases 1 to 3669)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Genome Res.
14 (10B), 2128-2135 (2004)"
SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName:
"Unpublished"
SGRef: number: 3; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(06-FEB-2017) BCCM/LMBP, Universiteit Gent, Technologiepark 927,
9052, BELGIUM"
SGRef: number: 4; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3669
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
terminator complement(88..115)
/label="rrnB T2 terminator"
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
terminator complement(207..293)
/label="rrnB T1 terminator"
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
primer_bind 357..373
/label="M13 fwd"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
protein_bind 389..486
/label="attL2"
/note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"
CDS 509..1366
/gene="MPG"
/label="DNA-3-methyladenine glycosylase"
/note="DNA-3-methyladenine glycosylase from Homo sapiens.
Accession#: P29372"
protein_bind complement(1369..1467)
/label="attL2"
/note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"
promoter complement(1485..1503)
/label="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
primer_bind complement(1508..1524)
/label="M13 rev"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
CDS 1955..2743
/label="SmR"
/note="aminoglycoside adenylyltransferase (Murphy, 1985)"
rep_origin 2839..3427
/direction=RIGHT
/label="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"