我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pTip-CH1.2
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 8337 bp
- 载体类型:
- Expression vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Nakashima N, Tamura T.
pTip-CH1.2 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pTip-CH1.2 载体序列
LOCUS V002645 8337 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018
DEFINITION Exported.
ACCESSION V002645
VERSION V002645
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
.
REFERENCE 1 (bases 1 to 8337)
AUTHORS Nakashima N, Tamura T.
TITLE A novel system for expressing recombinant proteins over a wide
temperature range from 4 to 35 degrees C
JOURNAL Biotechnol. Bioeng. 86 (2), 136-148 (2004)
PUBMED 15052633
REFERENCE 2 (bases 1 to 8337)
AUTHORS Nakashima N, Tamura T.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (18-OCT-2002) Nobutaka Nakashima, National Institute of
Advanced Industrial Science and Technology; Tsukisamu-Higashi
2-17-2-1, Sapporo, Toyohira-ku 062-8517, Japan
(E-mail:n-nakashima@aist.go.jp, Tel:81-11-857-8937)
REFERENCE 3 (bases 1 to 8337)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 8337)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Biotechnol.
Bioeng."; date: "2004"; volume: "86"; issue: "2"; pages: "136-148"
SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(18-OCT-2002) Nobutaka Nakashima, National Institute of Advanced
Industrial Science and Technology"; volume: " Tsukisamu-Higashi
2-17-2-1, Sapporo, Toyohira-ku 062-8517, Japan
(E-mail:n-nakashima@aist.go.jp, Tel"; pages: "81-11-857-8937"
SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..8337
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
CDS 170..976
/gene="tsnR"
/label="23S rRNA (adenosine(1067)-2'-O)-methyltransferase"
/note="23S rRNA (adenosine(1067)-2'-O)-methyltransferase
from Streptomyces azureus. Accession#: P18644"
CDS 1541..2716
/codon_start=1
/gene="Chlr"
/product="chloramphenicol resistance protein"
/label="Chlr"
/protein_id="BAD11263.1"
/translation="VPFAIYVLGLAVFAQGTSEFMLSGLIPDMARDLGVSVPAAGLLTS
AFAVGMIIGAPLMAIASMRWPRRRALLTFLITFMLVHVIGALTSSFEVLLVTRIVGALA
NAGFLAVALGAAMAMVPADMKGRATSVLLGGVTIACVAGVPGGAFLGEMWGWRAAFWAV
VVISAPAVVAIMFATPAEPLAESTPNAKRELSSLRSRKLQLMLVLGALINGATFCSFTY
MAPTLTDISGFDSRWIPLLLGLFGLGSFIGVSVGGRLADTRPFQLLAVGSAALLTGWIV
FALTASHPAVTLVMLFVQGALSFAVGSTLISQVLYAADAAPTLGGSFATAAFNVGAALG
PALGGLAIGMGLSYRAPLWTSAALVTLAIVIGAATLSLWRRPASVHESVPA"
gene 1541..2716
/gene="Chlr"
/label="Chlr"
regulatory 2905..3080
/gene="ThcA"
/regulatory_class="promoter"
gene 2905..3080
/gene="ThcA"
/label="ThcA"
CDS 3081..3839
/gene="tipA"
/label="HTH-type transcriptional activator TipA"
/note="HTH-type transcriptional activator TipA from
Streptomyces lividans. Accession#: P0A4T9"
promoter 4020..4124
/label="AmpR promoter"
CDS 4125..4982
/label="AmpR"
/note="beta-lactamase"
rep_origin 5156..5744
/direction=RIGHT
/label="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
regulatory complement(5995..6175)
/gene="ThcA"
/regulatory_class="terminator"
gene complement(5995..6175)
/gene="ThcA"
/label="ThcA"
CDS complement(6189..6206)
/label="6xHis"
/note="6xHis affinity tag"
gene complement(6255..6497)
/gene="TipA"
/label="TipA"
regulatory complement(6255..6273)
/gene="TipA"
/regulatory_class="ribosome_binding_site"
regulatory complement(6274..6497)
/gene="TipA"
/regulatory_class="promoter"
CDS 6936..7823
/codon_start=1
/gene="RepA"
/label="RepA"
/protein_id="BAD11266.1"
/translation="MKSATGGVLSDRQWADAVLLPHRPFATNNLQRGQYRMSRDDALAM
RYVEHSPHALLGSIVIDCDHVDAAMRAFEQPSDHPAPNWVAQSPSGRAHIGWWLGPNHV
CRTDSARLTPLRYAHRIETGLKISVGGDFAYGGQLTKNPIHPDWETIYGPATPYTLRQL
ATIHTPRQMPRRPDRAVGLGRNVTMFDATRRWAYPQWWQHRNGTGRDWDHLVLQHCHAV
NTEFTTPLPFTEVRATAQSISKWIWRNFTEEQYRARQAHLGQKGGKATTLAKQEAVRNN
ARKYDEHTMREAII"
gene 6936..7823
/gene="RepA"
/label="RepA"
CDS 7823..8107
/codon_start=1
/gene="RepB"
/label="RepB"
/protein_id="BAD11267.1"
/translation="MGGAKNPVRRKMTAAAAAEKFGASTRTIQRLFAEPRDDYLGRAKA
RRDKAVELRKQGLKYREIAEAMELSTGIVGRLLHDARRHGEISAEDLSA"
gene 7823..8107
/gene="RepB"
/label="RepB"