异源蛋白在大肠杆菌中大量表达是研究基因和蛋白功能的重要手段。异源蛋白由于来源广泛，其所使用的密码子常常与大肠杆菌有着显著的不同，因而不能分泌至细胞间质，即不能以可溶性蛋白而仅能以包涵体的形式表现出来，这一点在表达真核生物基因时尤为明显。 解决异源蛋白可溶性的手段之一是将目的基因和融合标签进行融合表达。常用的融合标签有麦芽糖结合蛋白( MBP) 、泛素样修饰蛋白( SUMO) 、氮源利用物质A( NusA) 和谷胱甘肽转移酶( GST) 等。 融合标签也有可能增加目的蛋白的产量。常在融合标签和目的...

从蛋白质结构与功能的基础研究到功能性蛋白质表达与纯化工艺的开发，亲和标签已经成为重组蛋白纯化的一个重要且有效的工具。它们不仅便于对融合蛋白的检测与纯化，而且可能对目标蛋白的理化性质产生有利的影响，可以提高重组蛋白的产量，增强重组蛋白的可溶性，促进重组蛋白的正确折叠。目前广泛应用的亲和标签自从20 世纪70 年代中期融合标签技术出现以来，亲和标签已成为一种重组蛋白纯化十分有效的工具，具有结合特异性高、纯化条件温和、纯化步骤简便、适用性广泛等显著优势。通常，亲和标签定义为对特定的生物或化学配基具有高...

导语DNA甲基化是表观遗传学(Epigenetics)的重要组成部分，在维持正常细胞功能、遗传印记、胚胎发育以及人类肿瘤发生中起着重要作用，是近年来新的研究热点之一。这个可以从国自然中标的结果看出。加上近来对甲基化在肿瘤中重要性的报道，想必这一热潮还有待持续。你是不是也对它垂涎已久，却苦于无从下手，其实甲基化的研究其实并没那么难，一句话，还是套路。随着高通量测序技术（NGS）技术的发展，使我们能够从全基因组水平来分析5’甲基胞嘧啶及组蛋白修饰等事件，由此能够发现很多传统的基因组学研究所不能发现的...

导语近年来，人们已经逐渐意识到，父亲可能通过多种途径对自己后代的健康产生影响，比如生活习惯、年龄等等。今天，小鱼盘点了近期相关的研究来进一步解释父亲对后代胚胎生存率、患癌风险及其精神状态的影响。父亲的线粒体去哪里了？几乎在所有动物的繁殖期间，只有母本线粒体能传递给后代，而父本的线粒体则在受精卵形成后被选择性的摧毁。为了弄清楚这个过程背后的具体机制，本文的研究人员通过电子显微镜和X线断层摄影术研究了多细胞蠕虫——秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）雄性精子的线粒体。研究发现...

导语作 为生命体"中心法则"的枢纽，RNA分子不仅是基因表达的调控分子，而且具有调节蛋白质合成的潜力。因而，RNA分子作为一种治疗剂，成为科研界的新宠， 并不足为奇。总的来说，RNA正在改变我们对基因、基因表达和基因调控的思考方式。最近，Science发表的三篇综述为我们解密RNA神奇的世界。mRNA的表观修饰RNA的表观修饰大约包括100种，最近已有初步证据证实RNA的表观修饰，可促进mRNA在翻译与剪接中的作用，并为进一步了解mRNA修饰对细胞及发育调节因子的潜在影响奠定...

·导语·非编码RNAs（ncRNAs） 种类颇丰：rRNA、tRNA、snoRNA、miRNA、lncRNA······我们曾经相信，ncRNAs只是制造转录mRNA时没有作用的副产 品，然而逐渐发现了它们对基因调控的关键作用，或为其他蛋白质和RNA提供了一个支架，但对这些ncRNAs如何相互作用以及控制细胞功能所知甚少，偶尔 掀开了其裙角却发现它还穿着N条打底裤······对ncRNAs研究限制的最大因素是缺乏可以使用的RNAs互作方法，《Molecular Cell》上最新的一篇论文介绍了研...

·导语·小伙伴们想不想动态接受本领域内大牛发表的最新论文推送？今天麦子给大家介绍一个学术网站：ResearchGate，中文称呼为“研究之门”，除了文献检索，该网站还提供科学社交网络服务，一举帮你打通国际合作困难的壁垒。现在已有包括52名诺贝尔奖得主在内的900万名研究人员加入。闭门造车、单枪匹马已经不适应这个科技技术发展的时代了，协同合作、开源分享必将是未来大趋势。当我们在谈这个那个互联网模式的时候，科研的互联网模式将是未来的趋势。目前科研有互联网模式吗？有，ResearchGate无疑是先行...

在淋病、梅毒和艾滋三大性病中，前两者现在都已经有了有效的治疗手段。在经过及时的治疗之后，对病人的生活影响很小。而艾滋病由于目前在全世界范围内仍缺乏根治HIV感染的有效药物，因此现在主要的治疗目标只是：最大限度和持久的降低病毒载量、提高生活质量、降低死亡率，可以说是个不治之症。如今，结合CRISPR技术人类对于艾滋的治疗除了药物抗病毒以外，开始向更深层的基因治疗迈进。在本月的CNS期刊中，就有三篇关于HIV的文章，都是从基因的层面进行分析。 HIV包膜三维结构HD出炉 ...

01研究热，易中标 02概念新、金额大 03肿瘤学一枝独秀，各学科略有涉及 04基础性研究胜于基础应用性研究 05阶梯格局，浙领风骚 06中青年专家领衔 ...

免疫荧光是标记免疫技术发展最早的一种，它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术，通过将抗体与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。免疫荧光步骤包括，细胞固定和通透，封闭，孵育一抗，二抗等。除了这些基本步骤，以下建议可以帮助您获得更好的实验结果。 1细胞固定和通透 为达到最佳的检测效果，细胞需要经过固定和通透。这些步骤非常关键，细胞和抗原需要保证最佳的结构，并利于抗体与抗原结合。通常情况下，需要通过以下步骤得以实...