核提取物的制备实验-辅助方案(细胞核提取方法的优化)
1. 按基本方案中歩骤1~7操作。 2. 将细胞核悬液分成5等份。在冷室内不断搅拌,按如下方法在每份悬液中加入1/3体积髙盐缓冲液,在第1份中加浓度最低(0.8 mol/l)的高盐缓冲液,其余各份中依次加入KCl浓度逐渐增髙(直到1.6 mol/l)的高盐缓冲液。轻轻混合30 min。 3. 25 000 g 离心30 min。将上清进行透析(见基本方案步骤10),直到加浓度最髙的那份核悬液的电导达到与透...
查看详情1. 按基本方案中歩骤1~7操作。 2. 将细胞核悬液分成5等份。在冷室内不断搅拌,按如下方法在每份悬液中加入1/3体积髙盐缓冲液,在第1份中加浓度最低(0.8 mol/l)的高盐缓冲液,其余各份中依次加入KCl浓度逐渐增髙(直到1.6 mol/l)的高盐缓冲液。轻轻混合30 min。 3. 25 000 g 离心30 min。将上清进行透析(见基本方案步骤10),直到加浓度最髙的那份核悬液的电导达到与透...
查看详情1. 按1:100的比例将过夜培养的菌液如人到新鲜的LB培养液中,于37℃培养至为OD 600 为0.3~0.4。 2. 加入等体积的2×TSS于菌液中,在冰上温和地混匀。 3. 将100 μl 感受恣细菌和1~5 μl DNA加入到一个冰冷的聚丙烯管或玻璃管中,4℃放置5~60 min。 4. 加入0.9 ml 含20 mmol/l ...
查看详情一、提取 食品中残留的有机氯农药的提取根据基体不同有多种选择,可用单一的溶剂和混合溶剂,提取的手段有用索氏提取、震荡提取、超声波仪器超声提取,加速溶剂提取,微波提取等。 二、净化 对于仅测定六六六,DDT等酸稳定的有机氯农药时,最常用的方法是采用浓硫酸磺化法,但是对于要同时测定如艾氏剂、狄氏剂等有机氯农药时不能采用浓硫酸磺化法,一般是采用柱色谱法,报道最多的是弗罗里硅土柱色谱法,在...
查看详情1. 将桂枝、杏仁、甘草加水200 ml浸泡,另将麻黄置砂锅内,加水600 ml浸泡10分钟。 2. 煎煮15分钟后,加上述三味药煎煮至150-300 m,滤过去渣,即得。 注意事项 1. 本方中麻黄既能疏表发汗以散风寒,又能宣利肺气以平喘咳是主药。 2. 桂枝温经通络,使表血液循环旺盛,以助麻黄发汗为辅。 3. 杏仁宣肺气,协助麻黄止咳平...
查看详情1. 称取:正确选择天平,掌握各种结聚状态的药品的称重方法。 2. 粉碎:是制备散剂和有关剂型的基本操作。要求学生根据药物的理化性质,使用要求,合理地选用粉碎工具及方法。 3. 过筛:掌握基本方法,明确过筛操作应注意的问题。 4. 混合:混合均匀度是散剂质量的重要指标,特别是含少量医疗用毒性药品及贵重药品的散剂,为保证混合均匀,应采用等量递加法(配研法)。对...
查看详情一、准备 1. 称取:正确选择天平,掌握各种结聚状态的药品的称重方法。 2. 粉碎:是制备散剂和有关剂型的基本操作。要求学生根据药物的理化性质,使用要求,合理地选用粉碎工具及方法。 3. 过筛:掌握基本方法,明确过筛操作应注意的问题。 4. 混合:混合均匀度是散剂质量的重要指标,特别是含少量医疗用毒性药品及贵重药品的散剂,为保证混合均匀,应采用等量递加法...
查看详情1a. 收集转瓶培养的细胞:将浓度为5~10×10 8 细胞/l 的培养液用1 L 的塑料瓶1 850 g 离心20 min,将细胞收入50 ml 锥形离心管中(每管收2~3 L 培养液中的细胞)。进行步骤2。 1b. 收集单层培养的细胞:单层细胞长满后去掉培养液。用PBS洗1次。将细胞刮入新鲜PBS液里,倒进锥形离心管中。进行步骤2。 2. 1 850 g 离...
查看详情一、准备 1.药物的称量 固体药物常以克为单位,根据药物量的多少,选用不同的架盘天平称重。液体药物常以毫升为单位,选用不同的量杯或量筒进行量取。用量较少的液体药物,也可采用滴管计滴数量取(标准滴管在20℃时,1ml水应为20滴 ),量取液体药物后,应用少许水洗涤量器,洗液并于容器中,以减少药物的损失。 2.溶解及加入药物 取处方配制量的1/2~3/4溶剂,加入药物搅拌溶解。溶解度大的药物可直接加入溶解;...
查看详情1. 50 g甘草粗粉中加1:200氨水50 ml,湿润15分钟,装筒,排气,浸渍24小时。 2. 快速渗漉(3-5ml/分钟)。 3. 滤液(为药材4-8倍或至无甜味)煮沸5分钟,倾泻过滤,水浴浓缩至约35 ml。 4. 冷后加浓氨水适量至显著氨臭,含测,加乙醇与蒸馏水至50 ml,静置、滤过即得。 注意事项 1. 一般药材用7号粉为...
查看详情一、准备 1. 原辅料的处理: 根据药材的有效成分不同,可采用不同的溶剂和方法进行提取,一般多用煎煮法提取有效成分,用等量乙醇精制时放置的时间、回收乙醇后放置的时间可根据实验安排情况,适当延长,以沉淀完全,上清液易于分离为宜。 2. 制颗粒:掌握湿法制粒的操作方法。控制清膏的相对密度时由于生产量较小,不方便用比重计测量,也可用桑皮纸上测水印的方法适当掌握,以不出现、或仅有少量水印为度;加辅料的量一般不超过...
查看详情