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天然培养基配制实验-胶原的配制

胶原是细胞生长良好的基质,它是从动物特定组织中用人工法提取出的,利于组织 和细胞的固定,亦属天然培养基。胶原主要用于细胞的附着,能改善细胞表面性质,促 细胞生长。胶原可来自大鼠尾腱、豚鼠真皮、牛真皮、牛眼水晶体等,其中以鼠尾胶原 最为常用和制备简便,可配制成0.1%—1%的醋酸溶液, 1.  取组织 取体重250 g 左右大白鼠一只,从尾根部切断鼠尾,置...

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天然培养基配制实验-水解乳蛋白的配制

水解乳蛋白系乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解的产物,是常用的天然培养基。含有丰 富的氨基酸;开始是为猴肾细胞培养设计的,但以后也用于培养基它很多细胞系,包括 初代培养细胞等,效果很好。近年由于广泛使用合成培养基,已代替了乳白蛋白。但其 成分简单,在培养基不足等特殊情况下尚有其应用价值。 1.  称量:称0.5 g 水解乳蛋白粉入烧杯中,加少许灭菌Hanks 液调成糊状; ...

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天然培养基配制实验-鸡血浆的制备

鸡血浆为最早用于培养的液体,含有纤维蛋白原和一定的营养成分,当与鸡胚胎汁混合后,能发生凝固,构成细胞生长的环境,利于细胞向三维空间生长,缺点是易于液化。因制备血浆后不再做无菌处理,全过程必须在严密无菌条件下进行。 利用生长一年 左右体大、健壮的雄鸡,采血压计前一天禁食,多喂水。 制备方法如下: 1.  肝素溶液制备 配制浓度20...

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核提取物的制备实验-辅助方案(细胞核提取方法的优化)

1.  按基本方案中歩骤1~7操作。 2.  将细胞核悬液分成5等份。在冷室内不断搅拌,按如下方法在每份悬液中加入1/3体积髙盐缓冲液,在第1份中加浓度最低(0.8 mol/l)的高盐缓冲液,其余各份中依次加入KCl浓度逐渐增髙(直到1.6 mol/l)的高盐缓冲液。轻轻混合30 min。 3.  25 000 g 离心30 min。将上清进行透析(见基本方案步骤10),直到加浓度最髙的那份核悬液的电导达到与透...

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大肠杆菌转化实验-一步法

1.  按1:100的比例将过夜培养的菌液如人到新鲜的LB培养液中,于37℃培养至为OD 600 为0.3~0.4。 2.  加入等体积的2×TSS于菌液中,在冰上温和地混匀。 3.  将100 μl 感受恣细菌和1~5 μl DNA加入到一个冰冷的聚丙烯管或玻璃管中,4℃放置5~60 min。 4.  加入0.9 ml 含20 mmol/l ...

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有机氯杀虫剂的残留分析实验

一、提取 食品中残留的有机氯农药的提取根据基体不同有多种选择,可用单一的溶剂和混合溶剂,提取的手段有用索氏提取、震荡提取、超声波仪器超声提取,加速溶剂提取,微波提取等。 二、净化 对于仅测定六六六,DDT等酸稳定的有机氯农药时,最常用的方法是采用浓硫酸磺化法,但是对于要同时测定如艾氏剂、狄氏剂等有机氯农药时不能采用浓硫酸磺化法,一般是采用柱色谱法,报道最多的是弗罗里硅土柱色谱法,在...

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汤剂、中药合剂及口服液的制备实验

1.  将桂枝、杏仁、甘草加水200 ml浸泡,另将麻黄置砂锅内,加水600 ml浸泡10分钟。 2.  煎煮15分钟后,加上述三味药煎煮至150-300 m,滤过去渣,即得。 注意事项 1.  本方中麻黄既能疏表发汗以散风寒,又能宣利肺气以平喘咳是主药。 2.  桂枝温经通络,使表血液循环旺盛,以助麻黄发汗为辅。 3.  杏仁宣肺气,协助麻黄止咳平...

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碳酸氢钠、次碳酸铋散(西皮氏散II号)的制备实验

1.  称取:正确选择天平,掌握各种结聚状态的药品的称重方法。 2.  粉碎:是制备散剂和有关剂型的基本操作。要求学生根据药物的理化性质,使用要求,合理地选用粉碎工具及方法。 3.  过筛:掌握基本方法,明确过筛操作应注意的问题。 4.  混合:混合均匀度是散剂质量的重要指标,特别是含少量医疗用毒性药品及贵重药品的散剂,为保证混合均匀,应采用等量递加法(配研法)。对...

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散剂的制备实验

一、准备 1.  称取:正确选择天平,掌握各种结聚状态的药品的称重方法。 2.  粉碎:是制备散剂和有关剂型的基本操作。要求学生根据药物的理化性质,使用要求,合理地选用粉碎工具及方法。 3.  过筛:掌握基本方法,明确过筛操作应注意的问题。 4.  混合:混合均匀度是散剂质量的重要指标,特别是含少量医疗用毒性药品及贵重药品的散剂,为保证混合均匀,应采用等量递加法...

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核提取物的制备实验-基本方案

1a.  收集转瓶培养的细胞:将浓度为5~10×10 8 细胞/l 的培养液用1 L 的塑料瓶1 850 g 离心20 min,将细胞收入50 ml 锥形离心管中(每管收2~3 L 培养液中的细胞)。进行步骤2。 1b.  收集单层培养的细胞:单层细胞长满后去掉培养液。用PBS洗1次。将细胞刮入新鲜PBS液里,倒进锥形离心管中。进行步骤2。 2.  1 850 g 离...

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