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糖的硅胶G薄层层析实验

硅胶 G 是一种添加了粘合剂的硅胶粉,约含12 %-13%的石膏,它可以把一些物质从溶液中吸附于自身的表面上,利用它对各种物质的吸附能力不同,再用适当的溶剂系统展层,使不同的物质得以分开,使用显色剂显色,得到不同的Rf 值。糖在硅胶 G 薄层上的移动速度与糖的分子量和羟基数有关,经过适当的溶剂展开后,糖在薄层上的移动速度是戊糖>己糖>双糖>三糖。 1.薄层层析与其他层析法比较有哪些优点? 2.选用展层剂的依据是什么? ...

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总糖含量的测定实验

苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸(或甲苯衍生物)起显色反应,己糖在490 nm处(戊糖及糖醛酸在480 nm)有最大吸收,吸收值与糖含量呈线性关系。 1. 材料的处理:将0.5~1 g所测的材料捣碎,用适量蒸馏水、玻璃碾磨器碾磨并分次抽提,混合液离心得抽提液即样品液。 2. 标准曲线制作:取50 μg/ml的己糖标准溶液0 ml,0.1 ml,0.2 ml,0.3 ml,0.4 ml,0.5ml于试管中,用水补足到...

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组织的分离实验-EDTA 消化分离法

EDTA是一种非酶性消化物,常用不含Ca 2+ 和Mg 2+ 的BSS 配成 0.02%的工作液。 关于EDTA的作用机制一般认为是:一些组织,尤其是上皮组织,在 生存中需要Ca 2+ 和Mg 2+ 才能维持组织的完...

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组织的分离实验-离心分离法

如培养物为血液、羊水、腹水和胸水等细胞悬液时,可采用离心法分离。一般用低 速500~1000 转/分速度,离心5~10 分钟即可。如悬液量大,离心时间可适当延长,但 如离心速度过大和时间太长,易压挤细胞使之受损或死亡。微量全血法淋巴细胞培养时, 可不必进行淋巴细胞分离,可采用全血培养法。在需用大量白细胞进行培养情况下,才 应采用特殊分离技术如使用分层液等方法。 国产...

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组织的分离实验-胰蛋白酶消化消化分离法

胰蛋白酶适于消化细胞间质较小的软组织,如胚胎组织、羊膜、上皮组织、肝、肾 等软组织,对传代细胞也非常好。 用于消化纤维性组织或较硬的癌组织则较差。Ca 2+ 和 Mg 2+ 对胰蛋白酶的活性有一定抑制作用,故需用不含这些离子的BSS 配制。 血清有抑 制...

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组织的分离实验-机械分散法

一、切割分离法 在进行组织块培养时,可采用剪切法,一般多剪切成1 mm 3 大 小的块。 具体操作如下: 1.  无菌切取1 cm 3 组织一块,置入青霉素瓶或小烧杯中,左手斜 持容器,右手持眼科尖剪或弯剪(剪柄较长为好)伸入容器中,反复剪...

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组织培养常用液的配制实验-胰蛋白酶溶液的配制法

胰蛋白酶主要采自牛或猪的胰脏,是一种黄白色粉末,易潮解,应放置冷暗干燥处 保存。主要作用是使细胞间的蛋白质水解,使细胞相互离散。胰蛋白酶的活力是用解离 酪蛋白的能力表示的。 1.  将D-Hanks液或Dulbecco盐溶液高压消毒灭菌,用NaHCO3液调节pH 至7.2 左右; 2.  称取胰蛋白酶粉末置烧杯中,先用少许消毒的盐溶液调成糊装,然后再补...

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合成培养基配制实验-合成培养液的配制

干粉型培养基是用球磨机或喷雾法将各种培养液成 分混合后制成,具有性质稳定、便于贮存和运输、使用方法简便等优点。具有维持细胞 生存和代谢需要的效果,与传统方式制备的合成培养基一样好。 干粉培养基因颗粒极细, 很容易完全溶解于水,配制培养液方法极易掌握,只要按照说明书将规定重量的干粉溶 解在一定量的水中即可;或按比例配制,经过消毒灭菌后即使用。 ...

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