亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白，对生物素有非常高的亲和力（结合常数高达1015M-1）。生物素很易与蛋白质（如抗体等）以共价键结合。这样，结合了酶的亲和素分子与结合有特异性抗体的生物素分子产生反应，既起到了多级放大作用，又由于酶在遇到相应底物时的催化作用而呈色，达到检测未知抗原（或抗体）分子的目的。 1.  包被抗体：用0.05 mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液将已知抗体作适当稀释，在每个聚苯乙烯酶标板的反应孔中加0.1 ml，于4℃过夜（18～24...

1.  提取 准确称取10.0 g磨碎的均匀试样于150 mL塑料离心瓶中，加入 30 mL磷酸缓冲溶液，混匀，用浓盐酸调节pH至2，加入10 mL丙酮，振荡 20 min，再加入40 mL无水乙醚，振荡20 min，于3500 r/ min下离心5 min。将上层溶液转移至装有200 mL蒸馏水的500 mL分液漏斗中，残渣再分别用10 mL丙酮和 40 mL无水乙醚重复提取两次，合并上层溶液于上述分液漏斗中，轻缓振...

拟除虫菊酯（pyrethroids）是一类重要的合成杀虫剂，具有高效、广谱、低毒 和易生物降解等特性。拟除虫菊酯在化学结构上具有共同的特点之一是分子结构中含有数个不对称碳原子，因而包含多个光学和立体异构体。这些异构体又具有不同的生物活性，即同一种拟除虫菊酯，总酯含量相同，但包含的异构体不同，杀虫效果也大不相同。因此在拟除虫菊酯农药的生产、质量控制、药效检验以及施药后的生物代谢农药残留调查中，都要求提供准确、快速的测定样品中的总酯和最具生物活性的异构体含量的方法。 ...

氨基甲酸酯类杀虫剂通常具有以下通式。见图2-4。 其中，与酯基对应的羟基化合物R1OH往往是弱酸性，R2是甲基，R3是氢或者是一个易于被化学或生物方法断裂的基团。对于氨基甲酸酯整体而言，结构上的变化主要在酯基上，一般要求酯基的对应羟基化合物具有弱酸性，如烯醇、酚、羟肟等；结构的另一个可变部分是氮原子上的取代基，氮原子上的氢可以被一个或两个甲基取代，也可以被酰基取代。根据结构的变化，可以将氨基甲酸酯划分为四种类型：N，N-二甲基氨基甲酸酯、N-甲基氨基甲酸芳基酯、N-甲氨基、甲酸肟...

有机磷农药（organophosphorus pesticides，简称OPPs）是含有C一P键或C—O—P、C—S—P、C—N—P键的有机化合物，目前常用的有四大类：   1.  磷酸酯类磷酸中3个氢原子被有机基置换后生成的化合物称磷酸酯。   2.  硫代磷酸酯类磷酸分子中的氧原子被硫原子置换后生成的化合物为硫代磷酸，硫代磷酸中的氢原子被有机基取代 ，即成为硫代磷酸酯。   3.  膦酸酯类和硫代膦酸酯类磷酸中的一个羟基被有机基置换!即在分子中形成...

哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3‘ 端均有一poly（A）尾，因此可以用oligo（dT）-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNA。 1.  用0.1 mol/L NaOH悬浮0.5～1.0 goligo（dT）-纤维素。 2. 将悬浮液装入灭菌的一次性层析柱或装入填有用DEPC处理并经高压灭菌的玻璃棉的巴斯德吸管中，柱床体积为0.5～1.0 ml，用3倍柱床体积灭菌水冲洗柱床。柱床体积为1 ml的oligo（dT）-纤...

不同种乃至不同变种的生物不但外部形态有变异，由于结构基因的差别，其表达产物酶和蛋白质也必然存在着一定的差别。所以同工酶分析作为一种遗传分析手段已广泛应用于品种资源调查、杂交子代测定、种子纯度鉴定等农林业各个领域，在指导生产方面发挥了很大的作用。此外，同工酶分析对研究不同产地、不同种属生物间的亲源关系和开发利用药物植物资源方面也有积极的意义。 1.样品液制备:取材料茎部1 g加两倍冷纯净水，在冰箱预先冷却的研钵中充分研成匀浆，然后离心（3500 r/ min，2...

牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35 g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物，等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调到4.7时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。 1 . 为什么酪蛋白可在等电点pH 下沉淀下来? 2 . 为什么可以用有机溶剂洗涤蛋白质沉淀? 1. 将100 ml牛乳放到500 ml烧杯中，加热到40 ℃，在搅拌下慢慢地加入预热到40 ℃、p...

硅胶 G 是一种添加了粘合剂的硅胶粉，约含12 %-13%的石膏，它可以把一些物质从溶液中吸附于自身的表面上，利用它对各种物质的吸附能力不同，再用适当的溶剂系统展层，使不同的物质得以分开，使用显色剂显色，得到不同的Rf 值。糖在硅胶 G 薄层上的移动速度与糖的分子量和羟基数有关，经过适当的溶剂展开后，糖在薄层上的移动速度是戊糖＞己糖＞双糖＞三糖。 1．薄层层析与其他层析法比较有哪些优点? 2．选用展层剂的依据是什么? ...

苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸（或甲苯衍生物）起显色反应，己糖在490 nm处（戊糖及糖醛酸在480 nm）有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系。 1. 材料的处理:将0.5～1 g所测的材料捣碎，用适量蒸馏水、玻璃碾磨器碾磨并分次抽提，混合液离心得抽提液即样品液。 2. 标准曲线制作:取50 μg/ml的己糖标准溶液0 ml，0.1 ml，0.2 ml，0.3 ml，0.4 ml，0.5ml于试管中，用水补足到...